Значај скрининга соја
Скрининг одговарајућих домаћина је неопходан за развој ЦМЦ биолошких препарата, који одређује квалитет и конзистентност производа и производног процеса. Директан циљ скрининга домаћина је да обезбеди кандидатску примарну ћелијску банку (ПЦБ), са високим нивоима експресије и високом стабилношћу како у погледу стабилности пролаза тако и стабилности складиштења. Провера одговарајућег домаћина је неопходна из два главна разлога:
- Прво, да се изабере микробни домаћин са високим нивоом експресије. Постоји више комерцијално доступних сојева који се користе за експресију различитих типова протеина, као што су токсични протеини, растворљиви протеини или еукариотски протеини.
- Друго, да скринирамо домаћина са генетском стабилношћу. Тестирање генетске стабилности је кључна тачка током животног циклуса производње. Предлаже се да је висока генетска стабилност препозната као још једна кључна карактеристика погодног соја.
Кључне речи: селекција микробних сојева, скрининг микробних сојева, високопропусни скрининг бактерија или квасца, скрининг соја високе производње, скрининг високо стабилних сојева, скрининг генетски стабилних сојева Примена: хумана медицина, медицина за животиње, вакцина, синтетичка биологија, рекомбинантни велики молекул биолошки препарати, биолошки реагенс
Услуге скрининга сојева компаније Иаохаи Био-Пхарма
Користећи више од 10 година ЦДМО искуства у микробиолошким биолошким препаратима, подржавамо развој и производњу различитих великих молекула, укључујући рекомбинантне подјединичне вакцине, вирусне честице (ВЛП), хормоне (инсулин, ГЛП-1, хормон раста), цитокине ( Интерлеукин-2/ИЛ-2, ИЛ-15, ИЛ-21), фактори раста (ЕГФ, ФГФ, НГФ), нанотела/антитела са једним доменом (сдАбс), ензими, итд.
Акумулирали смо богато искуство у избору различитих типова плазмидних вектора и микробних домаћина, укључујући бактерије Есцхерицхиа цоли (Е. цоли), и квасац Пицхиа пасторис (П. пасторис), Саццхаромицес церевисиае (С. церевисиае), Хансенула полиморпха (Х. полиморпха). Можемо пронаћи најбољи систем експресије за ваше јединствене биолошке лекове.
Прикупили смо различите микробне домаћине са јасним изворима и стандардним ЦоА, укључујући Е.цоли експресија и експресија квасца.
Детаљи услуге
Usluge
|
Детаљи услуге
|
Минимална временска линија/дан
|
Деливераблес
|
Конструкција соја (Е. цоли)
|
Трансформација плазмида (више домаћина)
|
5
|
ЦОА комерцијалних домаћина Извештај о изградњи соја
|
ПЦР верификација
|
Пречишћавање соја
|
Очување соја
|
Конструкција соја (квасац)
|
Припрема компетентних ћелија квасца
|
10
|
Линеаризација плазмида
|
Електро трансформација
|
Скрининг отпорности/недостатка исхране
|
Пречишћавање соја
|
Очување соја
|
Одговарајући преглед домаћина
|
Екстракција плазмида или генома ДНК
|
15-20
|
Процес скрининга домаћина ЦОА пројектованих сојева
|
ПЦР верификација, дигестија рестрикцијским ензимима
|
Циљно секвенцирање гена
|
Скрининг домаћина високе експресије
|
Скрининг домаћина са генетском стабилношћу
|
Очување соја
|
Студија случаја
Одговарајући домаћин побољшава ниво експресије протеина за 2.5 пута.
Ми смо задужени за развој високе производње Е. цоли напрезати се. Испробали смо три врсте реклама Е. цоли домаћини, на основу карактеристика циљног протеина. Показало се да је сој С1-1 и С1-2 (слика А: трака 1,2) побољшао ниво протеина до 3.5 пута од почетног соја клијента (слика А: трака 3).
Поред тога, сој С1-1 показао је високу генетску стабилност (слика Б) и препознат је као сој кандидат за примарно банкарство ћелија (ПЦБ).
Наше услужне карактеристике
Демонстрирана стручност са разним микробним домаћинима, нпр. Е. цоли ДХ5α, ТОП10, Транс10, БЛ21; П. пасторис СМД1168Х, Кс-33, ГС115, ПицхиаПинк сој 1/2/3/4; С. церевисиае Х. полиморпха.
Имамо искуство са Е. цоли периплазматска секреција, експресија растворљивог и инклузијског тела, као и интрацелуларна или секретна експресија квасца. Не додајемо антибиотике или додајемо антибиотике према регулаторним смерницама.
Ми успостављамо платформу за скрининг високе пропусности за скрининг високопродуктивних и стабилних сојева од преко сто сојева кандидата.
Осигурава се да је процес инжињеринга сојева и скрининга следљив, под добрим управљањем подацима и евиденцијом.