Дисулфидне везе се понекад називају СС везе или дисулфидни мостови. Дисулфидни мостови утичу на биоактивност биолошких лекова, као што су пептиди, протеини и антитела.
Иаохаи Био-Пхарма нуди услуге анализе дисулфидних веза углавном засноване на течној хроматографији-масеној спектрометрији (ЛЦ-МС).
Учествовали смо у структурној карактеризацији протеина различитих великих молекула, укључујући вакцине рекомбинантне подјединице, нанотела/ВХХ/ антитела са једним доменом (сдАбс), фрагменте антитела, хормоне/пептиде, цитокине, факторе раста (ГФ), ензиме, итд.
Регулаторни захтеви за дисулфидне везе
Постоје различити бројеви и формације дисулфидних мостова у различитим биолошким препаратима, што би требало у потпуности да се процени током студија карактеризације протеина ако очекивана примарна аминокиселинска секвенца производа садржи аминокиселину цистеин. Ово се такође захтева из регулаторног документа ИЦХ тема К6Б.
Аналитичке методе
Анализа |
Методе |
Дисулфидне везе |
Течна хроматографија-масена спектрометрија (ЛЦ-МС) након дигестије |
За неопходне податке пуне процене дисулфидних мостова и слободних тиола, научници из Иаохаи Био-пхарма спроводе мапирање пептида након дигестије са специфичном протеазом. Након тога анализирајте користећи он-лине ЛЦ/Елецтроспраи јонизациону масену спектрометрију (ЕС-МС) и/или ЛЦ/ЕС-МС/МС пре и после редукције.
Иаохаи Био-пхарма такође може да спроведе Елманов тест, који је важан део сваке процене производа који у потпуности садржи цистеин. У оквиру Елмановог теста, дериватизујемо сулфхидриле коришћењем (5,5'-дитио-бис-[2-нитробензоеве киселине]). Да би се одредили нивои слободних тиола, добијени производ је анализиран УВ спектрофотометријом на 412 нм.