Određivanje molekularne težine pomoću LC-MS
Cela molekularna težina je uvijek bila priznata kao važna karakteristika bioloških lekova. Analiza cele molekularne težine koristi se za demonstraciju proteinskih/peptidskih proizvoda i potvrdu bioloških lekova. Merenje molekularne težine je zahtev regulativnih smernica.
Yaohai Bio-Pharma nudi analizu cele molekularne težine u prirodnim, reduciranim i N-deglikoziranim uslovima. Koristimo tekuću hromatografiju-masenosnu spektroskopiju (LC-MS) za određivanje cele molekularne težine.
Regulativni zahtevi za molekularnu težinu
U ICH Q6 preporučuje se da „molekularna težina (ili veličina) se određuje pomoću hromatografije izlučivanjem po veličini, SDS-poliacrilamidnom gel elektroforezom (u reduciranim i ne-reduciranim uslovima), masnosnim spektrometrijom (MS) i drugim odgovarajućim tehnikama“.
Analitičke metode
| Analiza |
Metode |
| Molekularna težina |
LC-MS / Tekuća hromatografija/Elektrospraj mas-spektroskopija (LC/ES-MS) prirodnih, reduciranih, N-deglekosiliranih proteina ili podjedinica |
Analitički postupci
Ceo molekularni težinski:
- Izvršavanje LC-MS na prirodnom uzorku kako je primljen.
- Analiza podataka LC-MS.
Reducirani molekularni težinski:
- Tretiranje proteiničkog uzorka odgovarajućim reducirajućim sredstvom;
- Izvršavanje LC-MS-a na reduciranom proteinu;
- Analiza podataka LC-MS.
N-deglekosilirani molekularni težinski:
- Uklanjanje N-glikanova odgovarajućim enzimom;
- Izvršavanje LC-MS na N-deglikoziranoj proteini;
- Analiza podataka LC-MS.
Umanjeni i N-deglikozirani molekularni težina:
- Tretiranje proteiničkog uzorka odgovarajućim reducirajućim sredstvom;
- Uklanjanje N-glikanova odgovarajućim enzimom;
- Izvršavanje LC-MS na umanjenoj i N-deglikoziranoj proteini;
- Analiza podataka LC-MS.
Molekularna težina podjedinice proteina:
- Sečenje podjedinice
- Izvršavanje LC-MS na podjedinici proteina
- Analiza podataka LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
