Одређивање молекулске тежине помоћу ЛЦ-МС
Нетакнута молекулска тежина је одувек била препозната као важна карактеристика биолошких лекова. Анализа нетакнуте молекулске тежине се користи за демонстрирање протеинских/пептидних производа и верификацију биолошких лекова. Мерење молекулске тежине је захтев регулаторних смерница.
Иаохаи Био-Пхарма нуди анализу нетакнуте молекулске тежине у природним, редукованим, Н-дегликозилованим условима. Користимо течну хроматографију-масену спектрометрију (ЛЦ-МС) да одредимо нетакнуту молекулску тежину.
Регулаторни захтеви за молекуларну тежину
У ИЦХ К6 се препоручује да се „молекулска тежина (или величина) одреди коришћењем хроматографије искључивања величине, електрофорезе у СДС-полиакриламидном гелу (под редукционим и нередукционим условима), масеном спектрометријом (МС) и другим одговарајућим техникама“.
Аналитичке методе
| Анализа |
Методе |
| Молекуларна тежина |
ЛЦ-МС/течна хроматографија/масена спектрометрија електроспреј (ЛЦ/ЕС-МС) нативних, редукованих, Н-дегликозилованих протеина или подјединица |
Аналитичке процедуре
Нетакнута молекулска тежина:
- Извођење ЛЦ-МС на изворном узорку како је примљен.
- ЛЦ-МС анализа података.
Смањена молекулска тежина:
- Третирање узорка протеина одговарајућим редукционим агенсом;
- Извођење ЛЦ-МС на редукованом протеину;
- ЛЦ-МС анализа података.
Н-дегликозилована молекулска тежина:
- Уклањање Н-гликана са одговарајућим ензимом;
- Извођење ЛЦ-МС на Н-дегликозилованом протеину;
- ЛЦ-МС анализа података.
Смањена и Н-дегликозилована молекулска тежина:
- Третирање узорка протеина одговарајућим редукционим агенсом;
- Уклањање Н-гликана са одговарајућим ензимом;
- Извођење ЛЦ-МС на редукованом и Н-дегликозилованом протеину;
- ЛЦ-МС анализа података.
Молекуларна тежина протеинске подјединице:
- Подјединица Цлеаваге
- Извођење ЛЦ-МС на протеинској подјединици
- ЛЦ-МС анализа података
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
