Профилисање Н-гликана је неопходно за производњу биофармацеутика. Иаохаи Био-Пхарма пружа услугу профилисања Н-гликана коришћењем течне хроматографије-масене спектрометрије (ЛЦ-МС) ослобођених и обележених гликана. Општи кораци за припрему узорка Н-гликана укључују варење гликопротеина (ГП), дегликозилацију, пречишћавање, обележавање/дериватизацију и екстракцију чврсте фазе (СПЕ).
Учествовали смо у структурној карактеризацији протеина различитих великих молекула, укључујући вакцине рекомбинантне подјединице, нанотела/ВХХ/ антитела са једним доменом (сдАбс), фрагменте антитела, хормоне/пептиде, цитокине, факторе раста (ГФ), ензиме, итд.
Регулаторни захтеви за профилисање Н-Гликана
Према ИЦХ К6Б смерници, „за гликопротеине се одређује садржај угљених хидрата (неутрални шећери, амино шећери и сијалинске киселине). Поред тога, структура ланаца угљених хидрата, узорак олигосахарида (антенарни профил) и место(а) гликозилације полипептидног ланца се анализирају у мери у којој је то могуће.
Аналитицал Метход
| Анализа |
Методе |
| Профилисање Н-гликана |
Течна хроматографија-масена спектрометрија (ЛЦ-МС) анализа ослобођених и обележених гликана |
Процедуре
1. Ензимско ослобађање гликана са пептидом Н-гликозидазом Ф (ПНГасе Ф)
2. Дериватизација ослобођених гликана помоћу 2-аминобензамида (2-АБ)
3. Пречишћавање сакупљених Н-гликана на колони ТСК Амид - 80 ако су присутне велике количине детерџената, неиспарљивих соли или материјала са слободним амино групама
4. Обележавање флуоресцентним 2-аминобензамидом (2-АБ)
5. ЛЦ-МС анализа обележених Н-гликана
КСНУМКС. Анализа података
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
