Analiza N-glikozilacijskih lokacija je ključna za razumevanje funkcija glikana. Yaohai Bio-Pharma koristi tekućinsku kromatografiju-mas spektrometriju (LC-MS) nakon enzimatskog šišanja za N-glikozilacijske lokacije.
Bili smo angažovani u karakterizaciji strukture proteina različitih velikih molekula, uključujući Rekombinantne Podjedinične Cepice, Nanotijele/VHHs/ Jednodomene Antitijela (sdAbs), Odlomke Antitijela, Hormone/Peptidi, Cytokine, Rastne Faktore (GF), Enzime, Kolagene itd.
Regulativni zahtevi za N-glikozilacijsku lokaciju
Prema smernici ICH Q6B, „za glikoproteine određuje se sadržaj ugljikovoda (neutralni šećeri, aminoshecera i sijalične kiseline). Takođe, analiziraju se struktura lancova ugljikovoda, oligosacharidni uzorak (antenski profil) i lokacija glikozilacije polipeptidskog lanca u najvećoj mogućoj meri.“
Analitička metoda
Analiza |
Metode |
Lokus N-glikozilacije |
Tecnika tekućeg kromatografskog-masenskog spektroskopiranja (LC-MS) nakon enzimatskog šišavanja |
Postupke
1. Enzimatsko šišavanje proteina pomoću tripsine ili druge proteaze
2. Odvoj glykopetide fragmenta
3. Potvrdite sajte N-glikozacijije putem LC-MS
4. Analiziraj podatke