Деамидација бочних ланаца глутамина и аспарагина је уобичајена модификација у смислу утицаја на својства протеинских биофармацеутика. Деамидација се може десити у остацима глутамина, али обично много нижом стопом. На стопе деамидације утичу температура, пХ, локална структура протеина и бочни аминоацил остаци.
Иаохаи БиоПхарма нуди услугу тестирања деамидације аминокиселина, која вам омогућава да откријете деамидацију амино киселина помоћу течне хроматографије-масене спектрометрије (ЛЦ-МС).
Учествовали смо у структурној карактеризацији протеина различитих великих молекула, укључујући вакцине рекомбинантне подјединице, нанотела/ВХХ/ антитела са једним доменом (сдАбс), фрагменте антитела, хормоне/пептиде, цитокине, факторе раста (ЦФ), ензиме, итд.
Регулаторни захтеви за деамидацију аминокиселина
Према ИЦХ К6Б смерницама, деамидирани облици се могу детектовати и окарактерисати хроматографским, електрофоретским и/или другим релевантним аналитичким методама.
Аналитичке методе
Анализа |
Методе |
Деамидација |
течна хроматографија-масена спектрометрија (ЛЦ-МС) |
Процедуре
нпр. аспарагинска деамидација
1. Ензимско варење
2. ЛЦ-МС под условима течне хроматографије високих перформанси (ХПЛЦ)
КСНУМКС. Анализа података
Деамидација аспарагина се дешава преко сукцинимидног интермедијера (Суц), који је подложан рацемизацији и хидролизи, дајући четири Асп изомера, укључујући Л-Асп, Л-ИсоАсп, Д-Асп и Д-ИсоАсп.
У теорији, Глн деамидација би могла да генерише четири одговарајућа Глу изомера кроз процес сличан Асн деамидацији.
Масена спектрометрија високе резолуције лако идентификује 1-Да масену разлику између пептида који садрже Асн/Глн и њихових одговарајућих деамидираних парњака Асп/Глу.