Podľa centrálnej dogmy je messenger RNA (mRNA) mostom na prenos genetického materiálu z DNA do proteínov.
mRNA hrá biologickú úlohu kódovaním proteínov in vivo a zrelá mRNA v eukaryotických organizmoch pozostáva z piatich zložiek: 5' Cap (štruktúra uzáveru), 5' UTR (nekódujúca oblasť), ORF (otvorený čítací rámec), 3' UTR a 3' polyA chvost (polyadenylátový chvost).
Podrobnosti o službách
| Proces | Voliteľná služba | Detaily služby | Dodacia lehota (deň) |
| návrh a optimalizácia sekvencie mRNA | Návrh a optimalizácia kódovacích sekvencií | Zarovnanie sekvencií CDS Optimalizácia CDS kodónov | 1 |
| Návrh a optimalizácia nekódujúcich sekvencií | Návrh a optimalizácia sekvencie 5' UTR Návrh a optimalizácia sekvencie 3' UTR návrh a optimalizácia sekvencie polyA | 1-2 |
Prispôsobiteľné možnosti
| 5' UTR/3' UTR | - Prírodná sekvencia UTR
- Mutantná/upravená sekvencia UTR
|
| 3' PolyA chvost | - 100A ~ 120A chvost (odporúčané)
- Segmentovaný polyA chvost
- Ostatné Vlastný chvost
|
Spoločné stratégie pre návrh sekvencie mRNA
| Komponenty mRNA | Biologické funkcie | Stratégie optimalizácie |
| 5' Čiapka | Chráňte mRNA pred degradáciou exonukleázami a konajte v zhode s polyA chvostom na 3' konci, proteínom viažucim polyA a proteínom iniciačného faktora translácie, aby sa iniciovala translácia proteínu. | Prirodzená štruktúra Cap1 sa vyhýba receptorom rozpoznávajúcim vzory, a tak znižuje prirodzenú imunitnú odpoveď, ktorú možno dosiahnuť jednostupňovým ko-transkripčným uzáverom alebo dvojstupňovým enzymatickým uzáverom (podrobnosti pozri enzymatické uzávery mRNA a kotranskripčné uzávery). |
| 5' UTR | 5' UTR môže byť rozpoznané ribozómami, reguluje transláciu mRNA a ovplyvňuje stabilitu mRNA. | Obsahujú Kozakove sekvencie bez veľmi stabilnej sekundárnej štruktúry. Prirodzené UTR vysoko exprimovaných génov sú výhodné pre in vitro transkripčné (IVT) mRNA, ako je a-globín a p-globín. |
| CDS | Oblasti kódujúce proteín a kódujúce sekvencie pre antigény, protilátky alebo iné funkčné proteíny. | Optimalizácia kodónov zvyšuje úroveň translácie a poznamenáva, že určité neoptimálne kodóny môžu hrať úlohu pri skladaní proteínov. |
| 3' UTR | Regulovať transláciu a stabilitu mRNA. | Prirodzené UTR vysoko exprimovaných génov sú preferované pre IVT mRNA, ako je a-globín a p-globín. |
| 3' polyA chvost | Reguluje expresiu proteínov a chráni štruktúru uzáveru pred degradáciou. | Vyžaduje sa primeraná dĺžka (100-150 bp); kódovanie polyA chvosta na transkripčnom templátovom plazmide zaisťuje definovanejšiu dĺžku polyA konca. |
Čo robíme:
- Diverzifikovaný výber zdroja UTR
Viaceré zdroje vysoko exprimovaných prirodzených a modifikovaných UTR knižníc; zrelá stratégia modifikácie UTR;
- Špičkový tím pre optimalizáciu CDS
Spolupracujte s profesionálnym tímom pre algoritmy AI na dokončení optimalizácie kodónov.
- Rovnomerné rozloženie polyA chvosta
Pridajte polyA sekvencie podľa templátov DNA na presnejšiu kontrolu dĺžky mRNA.
- Diverzifikované optimalizačné kombinácie
Dosiahnite účinnú expresiu mRNA s nízkou imunogenicitou.
Prípadová štúdia
Sekvenčný dizajn mRNA s dvoma reportérmi: mRNA mCherry-eGFP
Služba mRNA spoločnosti Yaohai Bio-Pharma sa naďalej aktualizuje s návrhom a optimalizáciou dvojitej sekvencie reportérového génu, ktorá dosahuje koexpresiu duálnych génov.
Použitím konvenčného transfekčného činidla sa dvojitá génová tandemová sekvencia mCherry-eGFP mRNA transfekuje do 293T buniek a dva fluorescenčné signály mCherry (červená) a zosilnený zelený fluorescenčný proteín (eGFP) sa detegujú so súčasnou expresiou po 48 hodinách a stohujú sa graf je zvýraznený žltou farbou.
Expresia mRNA mCherry-eGFP v 293T bunke
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
