Príprava circRNA vyžaduje lineárne RNA ako predchodnú látku (RNA predchodca) pre cyklikáciu, pričom RNA predchodca je obvykle prichystaný pomocou linearizovaného plazmidového DNA ako transkripčnej šablóny a transkribovaný in vitro s pomocou T7 RNA polymerázy.
Vysokokvalitné plazmidové DNA je nevyhnutné pre in vitro transkripciu (IVT). Na základe zralého služobného platformy pre prípravu plazmidov môže Yaohai Bio-Pharma ponúknuť služby prípravy plazmidovej DNA (pDNA) s vysokou čistotou a štandardmi, aby sa zabezpečila integrita produktov IVT.
Detaily služieb
| Proces |
Voliteľná služba |
Podrobnosti služby |
Doba dodania (pracovné dni) |
| Príprava kruhového plazmidu |
Syntéza genu |
Syntéza genu (tretia strana) |
7-10 |
| Amplifikácia plazmidu |
Amplifikácia plazmidu |
2 |
| Extrákcia plazmidu |
| Príprava lineárneho plazmidu |
Linearizácia a čistenie plazmidu |
Linearizácia plazmidu |
1 |
| Čistenie linearizovaného DNA |
| Kontrola kvality plazmidovej DNA |
Koncentrácia čistoty |
Ultraviolettá (UV) spektrofotometria |
1-2 |
| Konformácia plazmidu |
Elektroforeza v Agarózovom Gele (AGE) |
| Kapilárna elektroforeza (CE) - voliteľná |
| Identifikácia plazmidu |
Identifikácia reštačným enzymom / AGE |
Naše vlastnosti
- Voľne rezuje šablónny plazmid
Prispôsobiteľný výber metód linearizácie
Optimalizácia metód extrakcie a čistenia DNA s cieľom dosiahnuť vysoké úspešnosť obnovy.
- Prísne Mierky Kontroly Kvality
Prísne štandardy riadenia procesu, pričom stupeň superhelikálneho konformácie plazmidových vzoriek pre výskum je viac ako 80 %.
Vysoké štandardy a efektívne služby prípravy plazmidov a kontroly ich kvality na splnenie potrieb experimentov.
Prípadová štúdia<br>
Použitím produkcie Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA ako príkladu, je stupeň superpojenia transkripčných šablónnych plazmidových vzoriek (výskumná trieda) viac ako 70 %, pričom stupeň linearizácie je blízky 100 %.
mCherry circRNA je prichystaná pomocou linearizovaného plazmidu ako šablóny a transfekovaná do buniek 293T. Po 24 hodinách transfekcie sa detekuje vysoká úroveň fluorescencie (červená fluorescencia), ktorá sa po 48 hodinách zvyšuje a stále sa dá detekovať aj na 7. a 14. deň po transfekcii.
belkovina mCherry je stabilne a účinne vyjadrená a čistota transkripčného šablónu môže spĺňať požiadavky produktu (DP) s vysokou kvalitou na cirkulárny RNA liečebný prostriedok.
Validácia in vitro výrazy mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
