I fremstillingsprosessen for in vitro transkripsjon (IVT) mRNA, kreves linearisert plasmid DNA som transkripsjonsmal for IVT ved hjelp av T7 RNA polymerase. Plasmid-DNA av høy kvalitet er avgjørende for in vitro-transkripsjon.
Basert på tjenesteplattformen for modne plasmidpreparater, kan Yaohai Bio-Pharma tilby en linearisert plasmid-DNA-preparattjeneste med høy renhet og høy standard for å oppnå effektiv IVT-transkripsjon.
Tjenestedetaljer
| Prosess | Valgfri tjeneste | Tjenestedetaljer | Leveringsperiode (arbeidsdag) |
| Sirkulært plasmidpreparat | Gensyntese | Gensyntese (tredjepart) | 7-10 |
| Plasmidamplifikasjon | Plasmidamplifikasjon | 2 |
| Plasmidekstraksjon |
| Linearisert plasmidpreparat | Plasmid linearisering og rensing | Plasmid linearisering | 1 |
| Linearisering DNA-rensing |
| Plasmid DNA kvalitetskontroll | Konsentrasjonsrenhet | Ultrafiolett (UV) spektrofotometri | 1-2 |
| Plasmidkonformasjon | Agarosegelelektroforese (AGE) |
| Kapillærelektroforese (CE) - valgfritt |
| Plasmididentifikasjon | Restriksjonsenzymidentifikasjon/ALDER |
Våre funksjoner
Fleksibelt utvalg av lineariseringsmetoder
Optimalisering av DNA-ekstraksjon og rensemetoder for å oppnå høye utvinningsgrader.
Strenge prosesskontrollstandarder, med en superhelisk konformasjonsrate av plasmidprøver for forskning på over 80 %.
Høy standard og høy effektivitet plasmid forberedelse og kvalitetskontroll tjenester for å møte eksperimentelle behov.
Case study
Med Yaohai Bio-Pharma-katalogen mRNA_luciferase-produktet som et eksempel, har transkripsjonsmalplasmidprøven (forskningsgrad) et superhelisk forhold på mer enn 90 %, et lineariseringsforhold nær 100 %, og et påfølgende transkripsjonsforhold på opptil 1:200 ( linearisert plasmid DNA:mRNA).
mRNA_luciferasen oppnådd gjennom fremstillingen av et linearisert plasmid som en mal transfekteres inn i 293T-celler, og enzym-substrat-reaksjonsaktiviteten blir evaluert 24 timer etter transfeksjon.
Et åpenbart sterkt luciferaseaktivitetssignal kan påvises, dvs. at luciferaseproteinet uttrykkes effektivt, noe som antyder at renheten til transkripsjonsmalen fullt ut kan tilfredsstille kravet til mRNA-preparat av høy kvalitet.
Supercoiled Plasmid Ratio Assay
Validering av luciferase-mRNA-ekspresjon in vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
