N-glykan profiling er avgjørende for produksjonen av biomedisiner. Yaohai Bio-Pharma tilbyr N-glykan profiling tjeneste ved bruk av Væskestyrt Kromatografi-MasseSpektroskopi (LC-MS) av frigjorte og merkede glykaner. De generelle trinnene for å forberede N-glykan prøver inkluderer fordøyning av glykoprotein (GP), av-glykosylering, renasjon, merking/derivatisering, og Fastfasextraksjon (SPE).
Vi har vært in involvert i Proteinstrukturkarakterisering av ulike store molekyler, inkludert Rekombinant Subunit Vaksiner, Nanokropper/VHHs/Enkeldomeneantikropp (sdAbs), Antikroppfragmenter, Hormoner/Peptider, Sytokiner, Vekstfaktorer (GF), Enzymer, Kollagener, osv.
Reguleringskrav for N-Glykan Profiling
I henhold til ICH Q6B-rettlinje, «for glykoproteiner bestemmes karbohydratinnholdet (nøytrale sukker, aminosukker og sialinsyurer). I tillegg analyseres strukturen av karbohydratkjedene, oligosukkermønsteret (antennprofilen) og glykosylasjonsstedet(e) på polypeptidkjeden i den utstrekning det er mulig.
Analytisk metode
| Analyse |
Metoder |
| N-glykan profilering |
Væskromatografi-masspektrometri (LC-MS)-analyse av frigjorte og merkede glykaner |
Prosedyrer
1. Enzytmatisk glykanfrigivelse med Peptide N-Glycosidase F (PNGase F)
2. Derivatisering av frigjorte glykaner ved 2-aminobenzamid (2-AB)
3. Renasjon av de samlede N-glykanene på en TSK Amide - 80 kolonne hvis store mengder avvaskemidler, ikke-volatile salt eller materialer med frie aminogrupper er til stede
4. Markering ved fluoresente 2-aminobenzamid (2-AB)
5. LC-MS-analyse av markerte N-glykaner
6. Dataanalyse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
