Alle kategorier
ENEN
mRNA Prosesutvikling

mRNA Prosesutvikling

Hjemmeside >  IVT RNA  >  mRNA CDMO  >  mRNA Prosesutvikling

IVT RNA

mRNA Prosesutvikling

Viktigheten av mRNA Prosesutvikling
  • Sirkulær plasmid DNA (pDNA) , som utgangsmaterialet, bør fullstendig lineariseres for å produsere en definert lengde RNA-transkript.
  • Som en vanlig syntese-strategi for RNA-molekyler, in vitro transkripsjon (IVT) tillater oss å oppnå tilpassede transkripter effektivt. IVT er en kompleks reaksjon som krever en blanding av DNA-mal, RNA-polymerase, RNase-inhibitor, inorganisk pyrofosfatase, kofaktorer, uregulerte eller regulerte nukleosidtrifosfater (NTPer) og buffer for å produsere mRNA-transkripter. Den ideelle RNA-yielden kan ikke oppnås med en enkelt løsning, da den avhenger av flere reaksjonsfaktorer. Dessuten kan IVT-reaksjonen være sekvensavhengig.
  • Etter IVT-reaksjonen bør produkts- og prosess-relaterte forurensetninger (f.eks., dsRNA, kortskjellige RNA-fraksjoner, DNA-mal, NTPer og RNA-polymerase) fjernes for å oppnå ren mRNA som et aktivt farmasøytisk ingrediens (API).
mRNA-løsninger fra Yaohai Bio-Pharma

Våre tilgjengelige generelle mRNA-prosessutviklingsmessige tjenester inkluderer:

  • Utvikling og optimalisering av prosess for lineære plasmider
  • IVT-prosessutvikling og -optimalisering
  • utvikling og optimalisering av reningsprosess for mRNA
Metodologi

Kvalitet ved design (QbD)

Design av erfaring (DoE)

En faktor om gangen (OFAT)

Tjenestedytninger
Tjenestedytninger Enhetsoperasjoner Parametre
Enzymatisk fordeling med én enzym Fordelingsreaksjon Reaksjonskomponenter, volum, rotasjonsfart
Purifisering av linearisert DNA IEX, Anion- eller kationvekslingskromatografi Typer kromatografiresin/kolonne Bufferoppsett, Mobile fasens sammensetning, pH, Flytethastighet, bindings-, vaskings- og elutionsbetingelser.
RPC, Reversed phase kromatografi
mRNA-syntese ved IVT IVT-reaksjon IVT-reaksjonskomponenter, volum, rotasjonsfart, IVT-tid
Fjerne DNA DNase-konsentrasjon
Enzytmessig dekkning Avlukkingsreaksjon Reaksjonskomponenter, volum, rotasjonsfart
mRNA Renhetstesting AC, Affinitetskromatografi Flere typer kromatografi resen/column (f.eks., AC, IEX, RPC, SEC, MMC), Bufferkomposisjon, injeksjonsvolum, Mobile fasekomposisjon (adsorbsjon og desorbsjon), pH, flythastighet, binding, vasking, og elutionsbetingelser.
IEX, Anion eller kationvekslingskromatografi
SEC, Avsaltning, og/eller størrelseseksklusjonskromatografi
RPC, Reversert fasekromatografi
MEM, Blandet moduskromatografi
Tangentiel strømfiltrering Membranmateriale og porstørrelse, fodestrømshastighet, transmembrantrykk (TMP), filtratvolum til membranarealforhold
Tidslinje for mRNA CDMO-løsninger

图片

Få et Gratis Tilbud

Get in touch