Alle kategorier
mRNA Medtranskripsjonskapning

mRNA Ko-transkripsjonell Lukking

I forhold til den to-trinns enzymatiske lukkingsmetoden kan den ene-trinns ko-transkripsjonelle lukkingsmetoden redusere prosessflyten betydelig. Metoden er resultatorientert og involverer tillegg av cap-analoger til den in vitro transkripsjonsreaksjonen (IVT). Cap-analoger kan introduseres allerede fra starten av transkripsjonen, og mRNA med cap-struktur kan oppnås ved fullføring av transkripsjonen. De nåværende tredjegenerasjons cap-analogene kan unngå omvendt luke og legge til Cap 1-struktur direkte på transkripsjonsproduktet.

Ved å ta hensyn til mRNA sin in vivo immunogenitet og oversettelsesnøyaktighet, bruker IVT-prosessen ofte visse typer modifiserte NTP'er, og vanlige modifiserte nukleotider er pseudouridin (Ψ), N1-metyl-pseudouridin (N1Ψ) og 5-metylcytosin (5mC).

undefined

undefined

Figur: Diagram over mRNA koh-overskrivnings- og toppingsreaksjon

Tjenestedytninger

Tjeneste

Tjenestedytninger

Leveringsperiode (arbeidsdag)

Koh-overskrivningstopping

In vitro-transkripsjonsrespons (Clean Cap analog) 1-2
Nukleotidmodifikasjoner (Ψ/N1Ψ/5mC)
Fjerne DNA-mal (DNase I)

Optimering av IVT-betingelser - valgfritt

Design og optimering av reaksjonskomponenter 3-7
Våre funksjoner
  • Diversifiserte Nukleotidmodifiseringsstrategier

Flere valgbare nukleotidmodifiseringsstrategier kan forbedre proteinettrykk.

  • Optimert Reaksjonssystem

Oppnå et høyt transkripsjonsforhold og høy dekkningseffektivitet.

  • Stabil Dekkingsprosess

Oppnå en dekkningsrate på mer enn 95%.

  • Strikt kontroll av RNase

Forhindre degradasjon av mRNA effektivt ved å kontrollere strengt RNase i eksperimentell miljø og forbruksgoder.

Casestudie

Yaohai Bio-Pharma har bygget opp en moden plattform for samtidig dekkning under transkription, ved å bruke rene dekk-analoger for å legge til Cap1-struktur direkte samtidig som man unngår omvendt dekkning. Etter standardisert prøveforbehandling og kapillær-elektroforese (CE) deteksjon, kan dekkningsraten av den utvidede grønne fluoreserende protein (eGFP) mRNA oppnå mer enn 95%.

图片图片

dekkings-effektivitet av eGFP mRNA på mer enn 95%

EGFP-mRNA og mCherry-mRNA, som er forberedt ved kofranskripsjonssluting, transfekteres henholdsvis i 293T-celler, og en sterke fluoresentsignal observeres etter 48 timer, noe som tyder på at mRNA-er effektivt uttrykkes i 293T-celler.

图片

Uttrykk av eGFP-mRNA og mCherry-mRNA i 293T-celle

Få et Gratis Tilbud

Get in touch