Produktene fra in vitro sirkulering og RNase R bereikning krever ytterligere fjerning fra in vitro transkription (IVT), inkludert ubrukte substrater i sirkuleringsreaksjonen, reaksjonsbivare og skadet RNA.
Yaohai Bio-Pharma har modne LiCl nedsettelse, magnetbeinrenasjon, selvutviklet renasjon og andre variasjoner av renasjonsløsninger for å effektivt fjerne ulike typer forurensetninger og forberede høygradig rent circRNA.
Renasjonsløsning for små mengder circRNA for celletransfeksjon og som en del av dyreforsøk.
Renasjonsløsning for små mengder circRNA for celletransfeksjon og som en del av dyreforsøk.
Bruksområder med høyere kvalitet;
Stabil og skalérbar renasjonsprosess for å møte GMP-produksjonskrav.
Prosess | Valgfritt tjeneste | Tjenestedytninger | Leveringsperiode (Dager) | Leveringsvarer |
circRNA-rengjøring | Konvensjonell renningsløsning | Lithiumklorid nedsetting | 1 | circRNA råstoff |
Rengjøring med magnetiske partikler | ||||
Høygradig rent circRNA-renning | Preparativ høytrykksvedkantning (HPLC) | 1-2 | ||
Buffertutveksling | Ultrafiltrering | 1 | ||
circRNA-kvalitetskontroll | Konsentrasjon/purifisering | Ultraviolet (UV) Spektrofotometri | 0.5 | Testavtale |
Renhet | Agarose Gelelektrofose (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - valgfritt | 1 |
Anvendelsesscenarier kan oppnås.
circRNA med en renhet på over 90%;
Gjennom strikt kontroll av RNases i eksperimentelt miljø og forbruksgoder, forhindre effektivt degradasjonen av RNA.
Yaohai Bio-Pharma har etablert en moden circRNA-rengjøringsløsning som kan fjerne ulike prosessrelaterte forurenninger effektivt.
De sirkulære RNA-produktene som er renset med den konvensjonelle løsningen er fortsatt tydelig blandet med knust RNA og introner.
Etter rengjøringsløsningen utviklet av Yaohai Bio-Pharma kan ulike lineære RNA-forurenninger, som knust RNA og introner, fjernes vellykket.
validering av circRNA-uttrykk
Ved bruk av en konvensjonell liposom, transfekteres renset eGFP circRNA i 293T-celler, og det observeres et fluoresenssignaal etter 24 timer og forsterkes videre etter 48 timer. Fluoresenssignalet kan fortsatt oppdages på den syvende og fjortende dagen etter transfeksjonen.