Selvbaserte effektivitetstester
Betydningen av mRNA-effektivitetstest
Med den raskt utviklende seg mRNAsjanger og terapi, trengs en spesifikk analysepanel for å teste effektiviteten (definere deres biologiske aktivitet), som involverer oversettelseseffektiviteten av mRNA. Disse metodene er typisk basert på celletransfeksjon og funksjonelle tester av målproteinet.
Yaohai Bio-Pharma tilbyr cellebaserte effektivitetstester for mRNA-drikkevarer eller LNP-produkter, inkludert celletransfeksjon (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, etc.) og ELISA eller Western Blotting (WB) tester.
Reguleringskrav for effektivitetstester
I henhold til WHO's reguleringsoverveigelser, «Effekten av hver batch av den endelige vaksinen bør bestemmes ved å bruke en hensiktsmessig kvantitativ og valideringsfunksjonell metode(r). Potensielle in vitro effektivitetstester kan inkludere cellebaserte transfeksjonsystemer eller cellevelfrie tester.» Og USP anbefalte en «cellebasert test» for å teste effekten av mRNA, dvs. uttrykkelsen av målproteinet.
Analytisk metode
|
Analyse
|
Metoder
|
|
Effektivitetstester
|
Cellebasert transfeksjon og identifisering av målprotein:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 celler, osv.
|
Prosedur
Steg 1. Cellebasert transfeksjon med mRNA eller mRNA-LNP
Cellene blir kultivert og transfisert med mRNA eller mRNA-LNP. I detalj er mRNA transfisert etter å ha blitt blandet med et transfeksjonsmiddel, mens mRNA-LNP transfiseres direkte inn i cellene. Etter 24-48 timer klargjøres supernatanten som inneholder det uttrykte proteinet ved sentrifugering.
Steg 2. Funksjonelle tester av målproteinet
Utfør ELISA- eller WB-tester for å vurdere den funksjonelle bindingen av målproteiner.
Casestudie
Selvbaserte Effektivitetstester av mRNA-prøver
Yaohai-BioPharma har utviklet en selvbasert effektivitetsmetode for mRNA, som omfatter selvkultur, selltransfeksjon og proteinfunksjonstester. Vi transfeksjonerte eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA, spike protein mRNA i 293T-seller, og oppdagede målprotein gjennom fluoresens, lysende eller farget signal, WB, ELISA.
Selvbaserte Effektivitetstester av mRNA-produkter av Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
