Основата на инкапсулацијата е дизајнот и развојот на системот за испорака. Добро дизајнираниот систем за испорака им овозможува на циркРНК молекулите да влезат во телото без да се разградуваат од ензимите на РНК и потоа ефикасно да се доставуваат до целното место, да ја преминат клеточната мембрана и да се ослободат интрацелуларно.
Липидните наночестички (LNPs) се најдобриот достапен систем за испорака, со предности во инкапсулацијата, in vivo изразувањето и in vivo безбедноста во споредба со другите системи за испорака. LNP со фрагменти од нуклеинска киселина лесно се проголтуваат во клетките и формираат интрацелуларни тела. Откако ќе влезе во клетката, киселата средина на интрацелуларното тело ја протонира и позитивно ја наполнува главата на јонизираниот липид, со што се спојува со внатрешната мембрана на интрацелуларното тело и ја ослободува целната нуклеинска киселина во клетката за дејство.
Услугата Yaohai Bio-Pharma circRNA продолжува да се подобрува и може да обезбеди услуга за енкапсулација на circRNA-LNP за да ги оптимизира релевантните критични параметри на процесот и да ја подобри конзистентноста и репродуктивноста на производството на лекот circRNA.
Процесот на | Детали за услугата | Период на испорака (ден) | Испораки |
инкапсулација на circRNA-LNP | Предтретман на материјал и течност | 2 | circRNA-LNP лек производ (DP) |
Мешање на микрофлуидни уреди | |||
Филтрација на тангенцијален проток | 1 | ||
Стерилизирање на филтрација | |||
circRNA-LNP контрола на квалитетот | Ефикасност на капсулација | 1 | Извештај од тестирањето |
Големина на честички и индекс на полидисперсност | |||
Зета потенцијал |
Брза синтеза, висока ефикасност на истражување и развој и однапред оптимизирани решенија;
Односот на инкапсулација може да достигне повеќе од 90%;
Големината на липидните наночестички може да се контролира со промена на стапката и односот на инјектирање течност;
Производите на circRNA-LNP се потврдени со ин витро клеточна експресија и можат ефикасно да го изразат целниот протеин.
Примероците на LNP-eGFP circRNA се подготвуваат и различните дози од нив (1ug, 2ug и 4ug) се директно трансфектирани во 293T клетки за да се потврди дали тие можат да го изразат целниот протеин. По 48 часа од трансфекцијата, може да се забележи јасен флуоресцентен сигнал и има ефект на зголемување на дозата на интензитетот на флуоресценцијата.
Lipo-circ_eGFP, составен од липозом и неинкапсулирана eGFP circRNA се зема како контрола.