Во процесот на подготовка на in vitro транскрипција (IVT) mRNA, линеаризирана плазмидна ДНК е потребна како шаблон за транскрипција за IVT со помош на T7 RNA полимераза. Висококвалитетната плазмидна ДНК е клучна за ин витро транскрипција.
Врз основа на платформата за услуга за подготовка на зрели плазмиди, Yaohai Bio-Pharma може да понуди линеаризирана услуга за подготовка на плазмидна ДНК со висока чистота и висок стандард за да се постигне ефикасна IVT транскрипција.
Детали за услуги
| Процесот на | Факултативна услуга | Детали за услугата | Период на испорака (работен ден) |
| Кружна плазмидна подготовка | Синтеза на гени | Синтеза на гени (трета страна) | 7-10 |
| Плазмидно засилување | Плазмидно засилување | 2 |
| Плазмидна екстракција |
| Линеаризирана плазмидна подготовка | Линеаризација и прочистување на плазмидите | Линеаризација на плазмидите | 1 |
| Линеаризација ДНК прочистување |
| Контрола на квалитетот на плазмидната ДНК | Чистота на концентрацијата | Ултравиолетова (УВ) спектрофотометрија | 1-2 |
| Плазмидна конформација | Електрофореза со гел агароза (AGE) |
| Капиларна електрофореза (CE) - по избор |
| Плазмид се идентификуваат | Идентификација на рестриктивен ензим/ AGE |
Нашите карактеристики
Флексибилен избор на методи за линеаризација
- Висока стапка на закрепнување
Оптимизација на методите за екстракција и прочистување на ДНК за да се постигнат високи стапки на обновување.
- Строга контрола на квалитетот
Строги стандарди за контрола на процесот, со суперспирална стапка на конформација на плазмидните примероци за истражување од над 80%.
- Процес на зрела платформа
Услуги за подготовка и контрола на квалитетот на плазмидите со висок стандард и висока ефикасност за задоволување на експерименталните потреби.
студија на случај
Земајќи го како пример производот mRNA_luciferase од каталогот Yaohai Bio-Pharma, плазмидниот примерок на шаблонот за транскрипција (истражувачко одделение) има суперспирален однос од повеќе од 90%, однос на линеаризација блиску до 100%, и последователен сооднос на транскрипција до 1:200 ( линеаризирана плазмидна ДНК: mRNA).
mRNA_луциферазата добиена преку подготовка на линеаризиран плазмид како шаблон се трансфицира во 293T клетки, а активноста на реакцијата ензим-супстрат се оценува 24 часа по трансфекцијата.
Може да се открие очигледен силен сигнал за активност на луцифераза, т.е. протеинот луцифераза се изразува ефикасно, што сугерира дека чистотата на шаблонот за транскрипција може целосно да ги задоволи барањата за висококвалитетна подготовка на mRNA.
Анализа на односот на суперсвиткан плазмид
Валидација на мРНК луцифераза изразување In Vitro
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
