Според централната догма, месенџерната RNA (mRNA) е мостот за преносот на генетскиот материјал од DNA до протеините.
mRNA игра биолошки роля што кодира протеини во животното тело, а зрелата mRNA при евариотските организми се состои од пет компоненти: 5' Cap (капова структура), 5' UTR (некодиран регион), ORF (отворен читачки фрем), 3' UTR, и 3' polyA хвост (полиаденилатен хвост).
Процес | Опционална Услуга | Детали за услугата | Период за достава (Ден) |
дизајн и Оптимизација на мРНК Секвенца | Дизајн и оптимизација на кодирачките секвенци |
Поравнање на CDS секвенца Оптимизација на CDS кодони |
1 |
Дизајн и оптимизација на не-кодирачki секвенци |
дизајн и оптимизација на 5' UTR секвенца дизајн и оптимизација на 3' UTR секвенца дизајн и оптимизација на polyA секвенца |
1-2 |
5’ UTR/3’ UTR |
|
3' PolyA Хвост |
|
компоненти на mRNA | Биолошки функции | Стратегии за оптимизација |
5' Кап | Зашиштувајте mRNA од деградација од страна на екзонуклеази и работете во симфонија со полиA хвостот на 3' крајот, полиA врска протеин и преводен почетен фактор протеин за да започне превод на протеин. | Природната Cap1 структура ја заобиколува патерн распознавачки рецептори и така намалува природната имунолошка одговор, што може да се постигне со еден чекор ко-транскрипционално капирање или два чекори ензимско капирање [види mRNA ензимско капирање и ко-транскрипционално капирање за детали]. |
5' UTR | 5' UTR може да биде распознат од рибозомите, да регулира преводот на mRNA и да влијае врз стабилноста на mRNA. | Содржат Козак секвенци без многу стабилен вторичен структура. Природни UTR-и на гени кои се изразуваат на високо ниво се предпочитани за транскрипција во тестовен conditions како што се α-глобин и β-глобин. |
CDS | Региони за кодирање на протеини и кодирачki низи за антиген, антитела или други функционални протеини. | Оптимизацијата на кодони зголемува нивото на транслација, бележијќи дека одредени неоптимални кодони можат да имаат улога во складирањето на протеините. |
3' UTR | Регулација на транслацијата и стабилноста на mRNA-то. | Природните UTR-и од генериски изразени гени се preferredStyle за IVT mRNA-та како што се α-globin и β-globin. |
3' polyA хвост | Регулација на протеинскиот израз и заштита на кап структурата од деградација. | Потребна е адекватна должина (100-150 бп); кодирање на polyA хвост на плазмидскиот транскрипционален темплет осигурува посакам определена должина на polyA хвостот. |
Множество извори на природни и модифицирани UTR библиотеки со висок израз; зрел стратегија за модификација на UTR;
Соопствувайте со професионален тим за AI алгоритми за да се заврши оптимизацијата на кодоните.
Додадете полиA секвенци според ДНК шаблони за да контролирате должината на мРНКа со посега точност.
Достигнете ефикасен израз на мРНКа со ниска имуногеност.
Дизајн на секвенца на двоен репортер мРНКа: mCherry-eGFP мРНКа
Службата на мРНКа од Yaohai Bio-Pharma продолжува да се надградува со дизајн и оптимизација на тандемна секвенца со двоен репортер ген, која достигнува совместен израз на двата гена.
Користејќи конвенционален реагент за трансфекција, тандемната секвенца на двоен ген mCherry-eGFP мРНКа се трансфектира во 293T клетки, и се засечуваат две флуоресцентни сигнали на mCherry (црвена) и потенциран зелен флуоресцентен протеин (eGFP) со истовремен израз след 48 часови, а стекнатиот график е истакнат во жолто.
Израз на mCherry-eGFP мРНКа во 293T клетка