Асая за потенција bazirana на ќелии
Значењето на асая на потенција за mRNA
Со брзото развојно на mRNA вакцини и терапии, е потребна специфична палета на методи за анализа за тестирање на потенцијата (дефинирање на нивната биолошка активност), што го зафаќа переводниот ефикасност на mRNA. Овие методи обично се базирани на трансфекција на ѕијели и функционални тестови на целната протеин.
Yaohai Bio-Pharma нуди асая на потенција bazirana na ѕијели за mRNA лековни супстанции или производи LNP, вклучувајќи трансфекција на ѕијели (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 ѕијели, итн.) и ELISA или Western Blotting (WB) асая.
Регулаторски захтеви за асая на потенција
Според регулаторските предлози на ВОЗ, „Ефикасноста на секој лот на крајниот вакцин треба да се определи користејќи соодветен количински и проверен функционален метод(и). Потенцијалните ин vitro тестови за ефикасност можат да вклучат клеткови трансфекциони системи или безклеткови асая.“ И УСП препорача „клетков асая“ за тестирање на ефикасноста на mRNA, т.е., израз на целевата белчинка.
Аналитички метод
|
Анализа
|
Методи
|
|
Тести за ефикасност
|
Клеткова трансфекција и идентификација на целевата белчинка:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 клетки, итн.
|
Процедура
Чекор 1. Клеткова трансфекција со mRNA или mRNA-LNP
Клетките се култивираат и трансфектираат со mRNA или mRNA-LNP. Подробно, mRNA се трансфектира низ мешање со трансфекционен реагент, додека mRNA-LNP се директно трансфектира во клетките. По 24-48 часови, пројаснете супернатанта што го содржи изразениот протеин преку центрифугирање.
Чекор 2. Функционални асая на целевата белчинка
Изведувајте ELISA или WB тестови за оценка на функционалното врскање на целевите протеини.
Студија на случај
Цел-базирани Асая на Ефикасност за mRNA примероци
Yaohai-BioPharma го разви цели-базираното метод на асая на ефикасност за mRNA, што вклучува културирање на клетки, трансфекција на клетки и протеински функционални асая. Трансфектиравме eGFP mRNA, mCherry mRNA, луцифераза mRNA, спајк протеин mRNA во 293T клетки и ја засечуваме целевата протеин преку флуоресцентен, светлинен или боен сигнал, WB, ELISA.
Цел-базирани Асая на Ефикасност за mRNA производи од Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
