こんにちは。RNAをクローンする方法について疑問に思ったことはありますか？RNAは、私たちの細胞の中に存在し、タンパク質を作るために様々な役割を果たす特別な分子です。そして、そのタンパク質が体が正常に機能するために必要なことをします。今回の記事では、研究者が使用するさらに興味深いプロトコル、インビトロ転写について説明します。これは、科学者が試験管（これは実験室で使う小さな瓶のようなもの）の中でRNAを大量に作ることを意味しますので、それぞれのステップに入りましょう。
前の投稿を終えた後、前回の投稿は少し退屈だったかもしれないと気づきました——では、湿式実験の楽しさに参加しましょう。さて、あなたが本当にRNAを作る旅に乗ったなら、次に必要な再剤やEFには何が必要でしょうか？これを達成するために、ヤオハイの製品と同じ特殊なタンパク質である酵素を使用する必要があります。 再合成ミドキシン製造 それは化学反応を触媒し、これらの酵素は分解を助けます。では、今我们需要のはDNAの一部です。この機能は、私たちがRNAを作成するために使用するテンプレートとしてのDNAです。RNA内の追加の規制配列、つまりヌクレオチドも必要です。これらのヌクレオチドは、RNAを作るために組み立てなければならない小さな部品のようなものです。また、味覚評価を他のものに移すために、細径の短いチューブも使用しています。最後に、反応が適切な温度であることを確認する機械（サーモサイクラー）が必要です。さらに、特定の実験にはいくつかの道具や製品が必要になるかもしれません。
ここで状況が分岐します。私たちはRNAストランドを一つ持っていて、今度はそれをさらに複製したいのです。 コンジュゲートVLPワクチンの製造 ヤオハイによって開発されました。それを実現するためには別の酵素、T7 RNAポリメラーゼを使用します。このユニークな酵素は、例えばRNA内の特定の領域を認識します。これにより、その後に多くのRNAコピーを作成するためにジャンピングポイントが設けられます。この時点で、T7 RNAポリメラーゼによってRNAストランドにさらに加えられ続け、転写物が大量に生成されるか、または停止させられるまで続きます。
RNAをできるだけ分離したら、さらにスクロールしてRNAのクリーニングと保存方法を見てください。将来の使用のためにRNAを保管できます。ローズ氏によると、これらの方法の一部はRNAの分離に関して少し極端な側面がありますが、常に使用するわけではなく、特定の実験では必要になることがあります。RNAがすべての汚染物から解放されれば、冷凍保存が可能です。この方法で安全に保管でき、その後さまざまな実験で使用できます。
開始材料の品質：DNAテンプレートが清潔で、損傷していないことを確認してください。成功する実験の確率を最大化するために、新しく再構成された核酸や新たに解凍された酵素を使用することもできます。
条件の微調整：すべての酵素とその核酸は、体内で特定の温度とpHでより効果的に機能します。また、ヤオハイのものでも同様です。 赤色蛍光mRNA 。ここで条件ごとの微妙な調整を行い、あなたのユニークなセットアップに最適なポイントを見つけるまで調整してください。
リバーストランスクリプターゼは、RNA分子からDNAコピーを作成するという点で特異的な酵素です。私たちのin vitro転写法でRNAを生成するために、両方のDNAとcDNA（補完DNA）をテンプレートとして使用しました。しかし、ほとんどの実験では科学者たちはDNAをRNAに転写することを望みます。これがその名前の由来でもあります。 mRNAポリ-A分布テスト これはヤオハイによって作られました。細胞内のRNA分子の研究からさらなる実験のために補完DNA鎖を生成するまで、科学研究において非常に価値のあるツールです。
RNAが最も一般的に使用される分子ツールの一つである現実の実験において、ヤオハイの製品も活用されています。 E. coliにおけるVLPワクチンの生産 定量アッセイ：これらの試験は、サンプル中に存在する特定の分子の量を示すことができます。例えば、科学者は細胞内の標的遺伝子から派生したRNAコピーのin vitroトランスクリプト準備を合成することができます。診断では、RNAを探している場合、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を実行してサンプル中のそのコピーを増幅することができます。これにより、科学者がどのように細胞で遺伝子が発現されているかを見ることができ、さらには一部の非常に高スループットなアッセイ、例えば細菌やウイルス感染の有無や、遺伝的障害の診断も可能になります。
in vitro Transcript Protocolは、微生物バイオ医薬品のCDMO（契約開発製造機関）のリーダーです。我々の焦点は、人間、獣医学、およびペット健康管理に適した微生物由来のワクチンや治療薬にあります。最先端のR&Dプラットフォームと製造技術を有し、微生物株の開発から細胞バンキング、プロセスおよび方法開発、臨床および商業生産までの一連の手順をカバーしています。これにより、革新的なソリューションの成功裏の提供が保証されます。長年にわたり、我々は微生物ベースのバイオプロセッシングに関する広範な知識を蓄積してきました。200以上のプロジェクトを成功裡に完了しており、US FDAやEU EMAなどの規制への準拠を支援します。また、オーストラリアのTGAや中国のNMPAにも対応します。我々の専門知識と豊富な経験により、市場のニーズに迅速に対応し、カスタマイズされたCDMOサービスを提供できます。
Yaohai Bio-Pharmaは、体外トランスクリプトプロトコルから作成されたバイオ医薬品の生産経験があります。当社はリスクがないことを確認しながら、カスタマイズされた研究開発および製造ソリューションを提供します。サブユニットワクチン、再構成型タンパク質、ペプチドホルモン、サイトカイン、成長因子、単一ドメイン抗体、酵素、プラミドDNA、mRNAなど、さまざまなモダリティに携わってきました。また、酵母（最大15g/Lの収量）の細胞外および細胞内分泌や、バクテリア（最大10g/Lの収量）の細胞内可溶性および包含体など、多くの微生物の専門知識を持っています。さらに、細菌ワクチンの製造のためにBSL-2発酵プラットフォームも確立しました。プロセスの改善、製品収量の増加、生産コストの削減に重点を置いています。強力な技術チームを活用することで、プロジェクトを迅速かつ信頼性高く遂行し、製品を市場に早く投入できるよう支援します。
ヤオハイ バイオファーマは、トップ10のバイオ製品メーカーで、微生物発酵に特化しています。私たちは強力な研究開発能力と最先端の設備を持つ現代的な施設を構築しました。微生物発酵および精製に準拠した5つの医薬品原薬製造ラインがあり、さらにカートリッジ、バイアル、プレフィルトシリンジ用の2つの自動充填仕上げラインも保有しています。使用可能な発酵規模はインビトロトランスクリプトプロトコルから2000Lまでです。バイアルの充填仕様は1mlから25mlまで、プレフィルトシリンジまたはカートリッジの充填仕様は約1-3mlです。私たちのcGMP準拠の生産施設は、臨床試験サンプルや商業製品の安定供給を確保します。当工場では大分子を生産し、世界中に出荷しています。
ヤオハイ・バイオファーマは、トップ10の微生物CDMOであり、in vitroトランスクリプトプロトコルや規制事務を統合しています。私たちは、現在のGMP基準およびグローバルな規制に準拠した品質管理体制を持っています。私たちの規制専門家チームは、生物学的製品の市場投入を加速させるために、グローバルな規制フレームワークに精通しています。私たちは、トレーサブルな生産プロセスと品質の高い製品を提供し、US FDAやEU EMAの規則に準拠することを保証します。オーストラリアTGAや中国NMPAも満足しています。ヤオハイ・バイオファーマは、GMP品質システムや生産施設について、ヨーロッパ連合の適格者（QP）による現地審査を成功裏に通過しました。さらに、ISO9001品質管理体制、ISO14001環境管理体制、ISO45001職業安全衛生管理体制に関する最初の認証審査も完了しています。
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