Ciao. Hai mai pensato come i ricercatori possano clonare un RNA? L'RNA è questa molecola speciale che troviamo nelle nostre cellule e che fa un sacco di cose per produrre proteine, e le proteine ci sono perché il nostro corpo possa fare tutte le cose giuste. In questo episodio, faremo una panoramica del protocollo molto più curioso utilizzato dai ricercatori: la trascrizione in vitro. E tutto ciò significa che i ricercatori stanno prendendo l'RNA e ne stanno producendo molta quantità in un tubo da saggio (che è uno di quei piccoli contenitori che i laboratori usano), quindi entriamo nei dettagli di ogni passaggio.
Dopo aver completato il mio post precedente, mi sono reso conto che l'ultimo potrebbe essere stato un po' noioso - unisciti al divertimento nei post sul laboratorio umido; quindi, mantenendo lo stesso tono, ora che sei salito sul treno del divertimento (cioè la produzione di RNA): Quali reagenti ti serviranno per il tuo EF?? Per raggiungere questo obiettivo, avremo bisogno di speciali proteine chiamate enzimi, identiche a quelli del prodotto di Yaohai Produzione di Midkine Ricombinante . Esso catalizza le reazioni chimiche, queste enzimi aiutano nella degradazione. Ora ci serve solo un pezzo di DNA. Questa funzione è il DNA che usiamo come modello per copiare il nostro RNA. Sequenze regolatorie aggiuntive nell'RNA, ovvero i nucleotidi, sono altresì necessarie. Questi nucleotidi sono come piccoli mattoncini che devono essere assemblati per formare l'RNA. Usiamo inoltre tubi corti di piccolo diametro per valutare il sapore in altri campioni. Infine, ci serve una macchina (un termociclatore) che si assicuri che le nostre reazioni siano alla temperatura giusta. Inoltre, potremmo aver bisogno di alcuni strumenti e prodotti per determinati esperimenti.
Qui le cose si dividono, abbiamo un filamento di RNA e ora vorremmo avere più copie di esso, anche il Produzione di Vaccini a VLP Coniugati sviluppato da Yaohai. Il modo per raggiungere l'obiettivo è utilizzare un altro enzima; la polimerasi RNA T7. Questo enzima unico, ad esempio, riconosce aree specifiche all'interno dell'RNA. Un cono di salto per produrre molte più copie di RNA nel processo successivo. A questo punto, verranno aggiunti ulteriori segmenti al filamento di RNA dalla polimerasi RNA T7 fino a quando non viene creato un ampio transcritto, o fino a quando non decidiamo di fermarlo.
Dopo aver isolato l'RNA il più possibile, scorri verso il basso per vedere come pulirlo e immagazzinarlo per un uso futuro. Rhoades: Alcuni di questi metodi sono un po' più estremi in termini di isolamento dell'RNA — non li useresti sempre, ma a volte per certi tipi di esperimento è necessario. Una volta che il nostro RNA è libero da eventuali contaminanti, può essere conservato congelato. In questo modo è sicuro e possiamo usarlo successivamente nei vari esperimenti.
Qualità del materiale di partenza: assicurati che il tuo DNA template sia pulito e non troppo degradato. Puoi anche integrare con nucleotidi freschemente ricostituiti ed enzimi appena scongelati per massimizzare le possibilità di un esperimento riuscito.
Regolazione delle condizioni: Tutti gli enzimi e i loro nucleotidi funzionano meglio a una temperatura e pH specifici all'interno del corpo, così come quelli del Yaohai mRNA Fluorescente Rosso . Ora regola leggermente le sfumature tra le condizioni fino a quando non trovi la chiave per la tua configurazione unica.
La reverse transcriptase è un enzima insolito, poiché produce una copia di DNA da una molecola di RNA. Abbiamo utilizzato sia le DNAs che un template di DNA (il cDNA) come input per il nostro metodo in vitro di generazione di RNA. Tuttavia, nella maggior parte degli esperimenti, gli scienziati vorrebbero trascrivere il DNA in RNA. La reverse transcription prende il nome da questo processo. Test della distribuzione poly-A dell'mRNA creato da Yaohai. È uno strumento inestimabile in tutta la scienza - dalla studio delle molecole di RNA all'interno delle cellule alla produzione di filamenti di DNA complementari per ulteriori esperimenti.
Esperimenti reali in cui l'RNA è uno degli strumenti molecolari più comunemente utilizzati, insieme al prodotto di Yaohai Produzione di Vaccini VLP in E. coli . Test quantitativi: Questi test possono rivelare la quantità di qualsiasi molecola specifica presente in un campione. Ad esempio, gli scienziati possono sintetizzare una preparazione di trascritti in vitro di copie di RNA derivati da un gene di interesse presente all'interno di una cellula. Il test diagnostico può quindi analizzare queste copie; nel caso in cui si stia cercando RNA, il test può eseguire una reazione a catena della polimerasi (PCR) per amplificare tali copie in un campione. Ciò consente agli scienziati di vedere come i geni sono espressi nelle cellule, e permette anche alcuni test ad altissimo throughput, come la presenza di un'infezione batterica o virale, e diagnosticare disturbi genetici.
in vitro Transcript Protocol è un leader nel settore CDMO dei biologici microbici. Il nostro focus è stato sui vaccini e terapie prodotti da microrganismi, adatti alla gestione della salute umana, veterinaria e degli animali domestici. Abbiamo le piattaforme RD più innovative e la tecnologia di produzione che coprono l'intero procedimento, dallo sviluppo di ceppi microbici e banche cellulari, allo sviluppo di processi e metodi, fino alla produzione clinica e commerciale, garantendo la consegna efficace di soluzioni innovative. Nel tempo, abbiamo accumulato una vasta conoscenza del bio processing basato su microrganismi. Più di 200 progetti sono stati completati con successo, e aiutiamo i nostri clienti a conformarsi alle regolamentazioni come quelle dell'US FDA e dell'UE EMA. Li assistiamo anche nella navigazione delle normative Australia TGA e China NMPA. La nostra competenza professionale ed esperienza ci permette di rispondere rapidamente alle esigenze del mercato e fornire servizi CDMO personalizzati.
Yaohai Bio-Pharma ha esperienza nella produzione di biologici creati tramite il protocollo di Transcript in vitro. Offriamo soluzioni personalizzate per la ricerca e lo sviluppo e la produzione, assicurandoci al contempo che non ci siano rischi. Siamo stati coinvolti in diverse modalità, come vaccini a sottounità ricombinanti, ormoni peptidici, citochine, fattori di crescita, anticorpi a singolo dominio, enzimi, DNA plasmidico, mRNA e molto altro. Siamo specialisti in numerosi microrganismi, inclusa la secrezione extracellulare ed intracellulare di lieviti (rendimenti fino a 15g/L) e batteri intracellulari solubili e corpo di inclusione (rendimenti fino a 10g/L). Abbiamo anche creato una piattaforma di fermentazione BSL-2 per produrre vaccini batterici. Ci concentriamo sul miglioramento dei processi, sull'aumento dei rendimenti del prodotto e sulla riduzione dei costi di produzione. Utilizzando un solido team tecnologico, possiamo garantire una consegna rapida e affidabile dei progetti, portando il tuo prodotto più velocemente sul mercato.
Yaohai Bio-Pharma, uno dei dieci principali produttori di prodotti biologici, si specializza in fermentazione microbica. Abbiamo costruito un impianto moderno con solide capacità di Ricerca e Sviluppo e attrezzature avanzate. Disponiamo di cinque linee di produzione di sostanze farmaceutiche che rispettano i requisiti GMP per fermentazione e purificazione microbica. Inoltre, possediamo due linee automatizzate per il riempimento di cartucce, fiale e siringhe prefissate. Le scale di fermentazione disponibili vanno da Transcript Protocol in vitro fino a 2000L. Le specifiche per il riempimento di una fiala variano da 1ml a 25ml. Le specifiche per il riempimento delle siringhe prefissate o delle cartucce vanno circa da 1-3ml. La nostra struttura di produzione conforme a cGMP garantisce un approvvigionamento costante di campioni clinici e articoli commerciali. La nostra fabbrica produce molecole grandi che vengono distribuite in tutto il mondo.
Yaohai BioPharma è una delle prime 10 CDMO microbiche che incorpora il protocollo di trascrizione in vitro nonché questioni regolatorie. Abbiamo un sistema di gestione della qualità in linea con gli attuali standard GMP e le regolamentazioni globali. La nostra squadra di esperti regolatori è competente nei framework regolatori globali per accelerare il lancio di biologici. Garantiamo processi produttivi tracciabili, prodotti di qualità e rispetto delle normative dell'FDA statunitense e dell'EMA europea. Anche l'Australia TGA e la Cina NMPA sono soddisfatte. Yaohai BioPharma ha superato con successo l'audit sul campo del Qualified Person (QP) dell'Unione Europea per il nostro sistema di qualità GMP e la nostra struttura produttiva. Inoltre, abbiamo superato le prime certificazioni degli audit per il Sistema di Gestione della Qualità ISO9001, il Sistema di Gestione Ambientale ISO14001 e il Sistema di Gestione della Salute e Sicurezza sul Lavoro ISO45001.