Plazmid: mala kružna molekula DNA s velikim potencijalom

Plazmidi, male kružne molekule DNA, služe kao bitni vektori za rekombinaciju DNA u istraživanju molekularne biologije i genskoj terapiji. Prinos i kvaliteta plazmida ključni su, pri čemu su superzamotani udio i sadržaj endotoksina dva značajna čimbenika koji utječu na kvalitetu plazmida.

Podvrste plazmida

Plazmidi ekstrahirani iz bakterije Escherichia coli (E. coli) postoje u različitim podtipovima: superzavojni (SC), otvoreni kružni (OC) i linearni (L) oblici (Slika 1). Među njima, supersmotani plazmidi pokazuju izvrsnu stabilnost, antigenost i visoku učinkovitost transfekcije i ekspresije.

Slika 1. Shematski dijagram uobičajenih podtipova plazmida

U elektroforezi plazmidne DNA u agaroznom gelu, redoslijed brzine migracije je supersmotana DNA, linearna DNA i otvorena kružna DNA (Slika 2).

Slika 2. Obrazac migracije različitih podtipova plazmida elektroforezom u agaroznom gelu

Yaohai Bio-Pharma kontinuirano unapređuje svoje procese i tehnike kako bi osigurala da udio supersmotanih plazmida transfekcijske kvalitete bude ≥85%, a plazmida istraživačke kvalitete ≥50%. Slijedi demonstracija slučaja (Slika 3), gdje se elektroforeza u agaroznom gelu kombinira sa softverom Gel-Pro Analyzer za otkrivanje supersmotanog udjela.

Slika 3. Rezultati inspekcije kvalitete udjela supersmotanog plazmida

Endotoksin

Endotoksin, sastavni dio stanične stijenke Gram-negativnih bakterija, prvenstveno se sastoji od lipopolisaharida A (LPS-A) kao svoje toksične komponente. Tijekom ekstrakcije plazmida, endotoksin se oslobađa u otopinu za lizu, ozbiljno utječući na učinkovitost transfekcije plazmida u stanice. Dodatno, može aktivirati nespecifične imunološke odgovore u stanicama, što dovodi do lažno pozitivnih rezultata u eksperimentima.

Yaohai Bio-Pharma usvaja pristup "neuvođenja" i "visokog uklanjanja", strogo kontrolirajući upotrebu reagensa i materijala koji sadrže endotoksin tijekom procesa pročišćavanja. Tvrtka je također razvila učinkovitu metodu uklanjanja endotoksina, koja nudi tri razine sadržaja endotoksina: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg i ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma posjeduje liniju usluga ekstrakcije plazmida visoke propusnosti, sposobnu isporučiti 1 mg ekstrahiranih plazmida u roku od jednog tjedna. Prema zadanim postavkama pruža više od sedam testova kontrole kvalitete (QC) kako bi se osigurala isporuka visokokvalitetnih plazmida visokog standarda iz više perspektiva.

Također aktivno tražimo institucionalne ili pojedinačne globalne partnere. Nudimo najkonkurentnije naknade u industriji. Ukoliko imate pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]