Plazmid: Mali krugli molekul DNA s velikim potencijalom

Plazmid, mali kružni molekuli DNA, služe kao ključni vektori za rekombinaciju DNA u istraživanjima molekularne biologije i genetskoj terapiji. Rezultat i kvaliteta plazmida su od ključne važnosti, pri čemu je omjer superuvijenih plazmida i sadržaj endotoksinova dva bitna faktora koji utječu na kvalitetu plazmida.

Podtipovi Plazmida

Plazmidi izdvojeni iz Escherichia coli (E. coli) postoje u raznim podtipovima: superuvijeni (SC), otvoreno cirkularni (OC) i linearni (L) oblici (Slika 1). Među njima, superuvijeni plazmidi izražaju odličnu stabilnost, antigeničnost i visoku transfekcijsku i izraznu efikaciju.

Slika 1. Shematski dijagram uobičajenih podtipova plazmida

U elektroforezi plazmidne DNA u agarosnom gełu, redoslijed brzine migracije je superuvijena DNA, linearna DNA i otvoreno cirkularna DNA (Slika 2).

Slika 2. Obrazac migracije elektroforeze agarosnog gela za različite podtipove plazmida

Yaohai Bio-Pharma je neprestano unapređivala svoje procese i tehnike kako bi osigurala da je udio superkotirane forme plazmida za transfekciju ≥85%, a za istraživačke plazmode ≥50%. U nastavku je prikazan primjer (Slika 3), gdje se agarozna geleta kombinira s programom Gel-Pro Analyzer za otkrivanje udia superkotirane forme.

Slika 3. Rezultati provjere kvalitete udia superkotirane forme plazmida

Endotoxin

Endotoxin, komponenta stijene Gram-negativnih bakterija, uglavnom se sastoji od lipopolisacharida A (LPS-A) kao svoje toksične komponente. Tijekom izlučivanja plazmida, endotoxin se oslobađa u rastvor za lišenje, što može ozbiljno utjecati na učinkovitost transfekcije plazmida u stanice. Pored toga, može aktivirati nespecifične imunoloske odgovore u stanicama, što može dovesti do lažno pozitivnih rezultata u eksperimentima.

Yaohai Bio-Pharma primjenjuje pristup "bez uvodenja" i "visoke uklanjanja", strogo kontrolirajući korištenje reagensa i materijala koji sadrže endotoksin tijekom cijelog procesa očišćavanja. Tvrtka je također razvila učinkovitu metodu uklanjanja endotoksina, ponuđujući tri razina sadržaja endotoksina: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg i ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma raspolazi linijom usluge visokopropusnog izvlačenja plazmida, sposobnom dostaviti 1 mg izvučenih plazmida već za tjedan. Po zadanome, pruža više od sedam testiranja kvalitete (QC) kako bi osigurala dostavu visoko-kvalitetnih, visoko-standardnih plazmida iz više perspektiva.

Također aktivno tražimo globalne partnerе iz institucija ili pojedince. Ponuditi ćemo najbolju kompenzaciju u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]