Kontrola kvalitete i primjene rekombinantnih proteina

Kontrola kvalitete rekombinantnih proteina je ključna za pouzdanost i reprodukcibilnost eksperimentalnih podataka. Svaki korak, od dizajna projekta do procesa proizvodnje, zahtijeva stroge strategije kontrole kvalitete.

Strategije Kontrole Kvalitete

Industrijski sektor pridržava strogo standardnih operativnih postupaka, dok akademska zajednica mora poboljšati profesionalnu znanju kako bi poboljšala reprodukcibilnost podataka. Proteini s posebnim biološkim primjenama ili biohemikalnim karakteristikama zahtijevaju prilagođene strategije kontrole kvalitete (QC).

Izdazujuće Primjerke i Rješenja

Yaohai Bio-Pharma raspolazi proširenom iskustvom u proizvodnji i čišćenju rekombinantnih proteina, uz tim stručnjaka, osiguravajući da vaša proizvodnja proteina bude izvršena s visokom čistoćom. Koristeći naše iskustvo iz stotina projekata, Yaohai sažeto objašnjava kako optimizirati čišćenje proteina.

Proteini koji se vezuju za nukleinske kiseline: Koraci uklanjanja nukleinsih kiselina, poput nukleaza ili PEI precipitacije, su nužni. Omjer A260nm/A280nm se praći kako bi se otkrio kontaminat nukleinsim kiselinama.

Miševa ferritin teži lanac 1 za krio-EM: Koraci čišćenja moraju biti optimizirani, a nuklease dodane kako bi se smanjio omjer A260nm/A280nm i osigurala čistoća proteina.

Hibridni protein Ljudski dsRBEC: Liziranje stanica koristi bufer koji sadrži ureu, nakon čega slijedi refolding na koloni kako bi se dobili funkcionalno aktivni proteini.

Proteini koji se vezuju za divalente katione: Tijekom izražavanja i čišćenja moraju se dodati specifični divalenti kationi, a helaatori treba izbjegavati.

Željezov-sulfidni proteini: Imidazol treba izbjegavati kako bi se spriječilo ometanje [2Fe ± 2S] klastera, osiguravajući pravilno savijanje i funkciju proteina.

Rastvoriti fragmant LLT1: Dizajn mutanta optimizira oblikovanje disulfidnih veza i foldiranje proteina, što rezultira stabilnim i visokoproduktivnim proteinima.

Kristalizacija CLK1 kinaze: Ko-ekspresija s λ-fosfatazom uklanja fosfate s fosfirlanih mjesta, a veličinska izlučiva kromatografija (SEC) i anionska zamjenska kromatografija koriste se za dobivanje homogenog CLK1-a bez heterogenih fosfirlanih stanja.

Proteini za uporabu kao antigeni: Ocijenjivanje čistoće nužno je kako bi se izbjegla kontaminacija s vrlo imunogennim proteinima. Za strukturne epitope antitijela mora se održati trodimenzionalna konformacija antigena.

Proteini podložni agregaciji: Strategije poput testiranja različitih štrana i smanjenja temperature tijekom uzgoja koriste se za ograničenje problema agregacije, a dizajniraju se brze strategije čišćenja.

Uklanjanje endotoksinova: Metode poput pozitivno-nabijene kromatografije i afinitetne kromatografije polikationskim ligandom uklanjaju endotoksine, osiguravajući da su LPS nivoi ispod granica primjene.

Kompleksi proteina: Podjedinice se izražavaju zasebno i montiraju in vitro ili su zajedno izražene kako bi se formirale funkcionalne komplekse. Cijelost kompleksa procjenjuje se homogenost i molarna masa.

Zaključak

Proizvodnja proteina počinje strategijskim dizajnom, uz razmatranje biohemikalnih svojstava i primjena. Tijekom izražavanja, čišćenja i kontroliranja kvalitete, uvjeti i metode optimiziraju se za stabilnost, neprikupljanje i prirodno stanje. Čišćeni proteini služe raznim daljnjim uporabama, poput biološke karakterizacije.

Yaohai Bio-Pharma također aktivno traži globalne partnerе, institucionalne ili pojedinačne, i nudi najkonkurentniju kompenzaciju u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]