Istražite čistoću RNA: kromatografija ionske izmjene

Kromatografija ionske izmjene učinkovito pročišćava RNA odvajanjem molekula s različitim nabojem. Ovisno o stanju protonacije na različitim pH razinama, molekule RNA mogu nositi pozitivne ili negativne naboje. Ovo se svojstvo koristi u kromatografiji ionske izmjene za kontrolu interakcija između RNA i stacionarne faze podešavanjem ionske jakosti i pH otopine, čime se postiže odvajanje.

Kao prvi i najveći mikrobni biološki CRDMO u Velikoj Kini, Yaohai Bio-Pharma nudi end-to-end prilagođena rješenja na jednom mjestu ili samostalne usluge u rasponu od sinteze RNK, sojevog inženjeringa i konstrukcije, uzvodnog i nizvodnog razvoja procesa, do GMP-a ili ne - Proizvodnja ljekovitih tvari na razini GMP-a i usluge punjenja i dorade za različite modalitete, kao što su mRNA, circRNA, plazmidna RNA, rekombinantne proteine, peptide, enzime, protutijela s jednom domenom i VLP-ove za ljudsku i veterinarsku upotrebu.

Istražimo primjene koje nudi kromatografija ionske izmjene za specifične procese pročišćavanja.

1. Priprema uzorka: Otopite složenu smjesu koja sadrži ciljne biomolekule u odgovarajućoj puferskoj otopini. Odabir pH može utjecati na stanje naboja biomolekula, čime utječe na učinkovitost odvajanja.

2. Odabir kolone: ​​Odaberite odgovarajuću vrstu kolone za ionsku izmjenu na temelju karakteristika naboja ciljnih molekula. Uobičajeni materijali kolone uključuju kationske izmjenjivačke smole i anionske izmjenjivačke smole, ovisno o naboju ciljnih molekula.

3. Unošenje uzorka: Propustite pripremljenu otopinu uzorka kroz kromatografsku kolonu. Funkcionalne skupine na smoli za ionsku izmjenu međusobno djeluju s nabijenim ionima u uzorku, što rezultira različitim retencijskim vremenima za molekule s različitim svojstvima naboja.

4. Postupak eluiranja: Upotrijebite otopine pufera za eluiranje s postupnim povećanjem ionske jakosti ili promijenjenim pH za eluiranje ciljnih biomolekula iz kolone. Ovi uvjeti eluiranja postupno modificiraju interakciju između biomolekula i smola za ionsku izmjenu, postižući pročišćavanje ciljnih molekula.

5. Prikupljanje pročišćenih ciljnih molekula: Prikupite i analizirajte pročišćene frakcije ciljnih biomolekula na temelju njihovih adsorpcijskih karakteristika i slijeda eluiranja.

6. Naknadna obrada: Izvedite potrebne korake naknadne obrade na prikupljenim ciljnim molekulama, kao što su koncentracija, otapanje, ponovna kristalizacija, itd., kako biste dobili konačni proizvod visoke čistoće i aktivnosti.

Kromatografija ionske izmjene vrijedna je u biofarmaceutskoj i biokemijskoj industriji zbog svoje sposobnosti učinkovitog pročišćavanja biomolekula kao što su proteini, nukleinske kiseline i peptidi, dajući proizvode visoke čistoće neophodne za istraživanja, dijagnostiku i terapeutske primjene.

Yaohai Bio-Pharma također aktivno traži institucionalne ili pojedinačne globalne partnere i nudi najkonkurentniju naknadu u industriji. Ukoliko imate pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]