Iskorištavanje bakterijskih IB za proizvodnju rekombinantnih proteina

Bakterijska inkluzijska tjelešca (IB) u proizvodnji rekombinantnih proteina nude lakoću odvajanja, stabilnost, visoku ekspresiju i otpornost na razgradnju, te mogu eksprimirati toksične proteine ​​s biološkom aktivnošću. Napredak u razumijevanju IB-a otvara nove puteve za obradu, s izazovima i rješenjima identificiranim za buduća istraživanja.

Yaohai Bio-Pharma ima više od 10 godina iskustva u proizvodnji rekombinantnih proteina korištenjem sustava mikrobne fermentacije. Naš snažan i profesionalan tim stručnjaka jamči da pročišćeni ponovno smotani protein može doseći 1.5 g/L.

Strategije obrade i izazovi IB-a

Razdvajanje IB-ova Metode za odvajanje IB ovise o strukturi-funkciji proteina i potrebama primjene. Fizičke metode ometaju stanice, ali mogu naštetiti kvaliteti proteina. Enzimske metode poboljšavaju čistoću, ali su skupe. Nježni deterdženti djeluju za klasične IB-ove, a ne za neklasične. Kontrola pH je ključna za topljivost. Taloženje elektroforezom je jednostavno, ali nije skalabilno za biološki aktivne proteine.

Solubilizacija IB-a Solubilizacija IBs je ključna za oporavak aktivnih proteina. Jaki denaturanti oštećuju nativnu strukturu, dok nedenaturansi nisu prikladni za klasične IB. Nježni solubilizatori mogu otopiti IB dok štite strukturu proteina, ali ne sve proteine. Budući rad zahtijeva bolje algoritme za odabir solubilizatora.

Strategije renaturacije Renaturacija proteina ključna je za funkcionalnost. Renaturacija in vitro suočava se s izazovima. Izbor solubilizatora, koncentracija proteina, uvjeti i metode utječu na ishod. Nježni solubilizatori štite nativnu strukturu i poboljšavaju kvalitetu. Umjerene koncentracije i optimizirani uvjeti smanjuju agregaciju. Metode temeljene na stupcima s monolitnim matricama nude veću čistoću i prinos.

Pročišćavanje renaturiranih proteina Daljnjim pročišćavanjem odvajaju se pogrešno savijeni proteini od pravilno savijenih. Tradicionalna kromatografija se bori sa sličnim proteinima. Alternativne metode nude prednosti, ali zahtijevaju odabir specifičan za ciljani protein. Razvijanje univerzalne metode pročišćavanja ostaje izazov.

Zaključak

IB nude prednosti u proizvodnji rekombinantnih proteina, ali predstavljaju izazove u procesuiranju. S dubljim razumijevanjem strukture-funkcije proteina unutar IB-a i napretkom u odvajanju, solubilizaciji, renaturaciji i pročišćavanju, uskoro bi se mogao postići oporavak aktivnih proteina visoke propusnosti. To će smanjiti troškove i ubrzati biofarmaceutsko istraživanje i razvoj, potičući rast industrije.

Yaohai Bio-Pharma također aktivno traži institucionalne ili pojedinačne globalne partnere i nudi najkonkurentniju naknadu u industriji. Ukoliko imate pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]

Za više detalja o tvrtki Yaohai Bio-Pharma, molimo pogledajte web stranicu: www.yaohaibio-pharma.com