Korištenje bakterijskih IB-a za proizvodnju rekombinantnih proteina

Bakterijske inkluzione tijela (IBs) u proizvodnji rekombinantnih proteina nude jednostavnost odvojavanja, stabilnost, visoku ekspresiju i otpornost na degradaciju, te mogu izražavati toksične proteine s biološkom aktivnošću. Napretak u razumijevanju IB-a otvara nove putove za obradu, s identificiranim izazovima i rješenjima za buduća istraživanja.

Yaohai Bio-Pharma ima više od 10 godina iskustva u proizvodnji rekombinantnih proteina pomoću mikrobioloških fermentacijskih sustava. Naš jači i profesionalni tim stručnjaka osigurava da purificirani refoldani protein može dostići 1,5 g/L.

Strategije i izazovi obrade IB-a

Odvojavanje IB-a Metode za odvajanje IB ovisne o strukturi-projektu proteina i potrebama primjene. Fizičke metode rušiće stanice, ali mogu štetiti kvalitetu proteina. Enzimatske metode poboljšavaju čistoću, ali su skuplje. Lagani detergenti rade za klasične IB-ove, ne za neklasične. Kontrola pH-a je ključna za rastvorljivost. Elektroforetsko odlaganje je jednostavno, ali nije skalabilno za biološki aktivne proteine.

Rastvaranje IB-a Rastvaranje IB-a ključno je za oporavak aktivnih proteina. Jači denaturanti štete prirodnoj strukturi, dok nisu ne-denaturanti pogodni za klasične IB-e. Lagani rastvari mogu rastvoriti IB-e pritom štiteći strukturu proteina, ali ne i sve proteine. Buduća istraživanja trebaju bolje algoritme za izbor rastvari.

Strategije renaturation Renaturation proteina je ključna za funkcionalnost. Renaturation in vitro susreće se s izazovima. Izbor solubilizatora, koncentracija proteina, uvjeti i metode utječu na ishod. Jaki solubilizatori štite prirodnu strukturu i poboljšavaju kvalitetu. Umerene koncentracije i optimizirani uvjeti smanjuju agregaciju. Kolonanske metode s monolitičkim matricama nude veću čistoću i dobijanje.

Čišćenje renaturiranih proteina Daljnje čišćenje razdvaja pogrešno savijane od točno savijanih proteina. Tradicionalna hromatografija ima problema s sličnim proteinima. Alternativne metode nude prednosti, ali zahtijevaju odabir specifičan za ciljni protein. Razvoj univerzalne metode za čišćenje još uvijek ostaje izazov.

Zaključak

IB-ovi nude prednosti u proizvodnji rekombinantnih proteina, ali stvaraju i izazove u obradi. S dubljim razumijevanjem struktura-funkcija proteina unutar IB-a i napretkom u odvajanju, solubilizaciji, renatraciji i očišćavanju, uskoro može biti postignuto visokopropusno oporavljivanje aktivnih proteina. To će smanjiti troškove i ubrzati razvoj biofarmaceutske tvornice, što će potaknuti rast industrije.

Yaohai Bio-Pharma također aktivno traži globalne partnerе, institucionalne ili pojedinačne, i nudi najkonkurentniju kompenzaciju u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]

Za više detalja o Yaohai Bio-Pharma, molimo posjetite web stranicu: www.yaohaibio-pharma.com