Podrška Metodama Modifikacije Reporter RNA

Kada birate koji način modifikacije reporter mRNA je preferiran, nema odlučujuće odgovore, jer svaki način i reporter gen ima svoje prednosti i primjene. Evo nekih uobičajenih metoda modifikacije mRNA i reporter gena uz njihove karakteristike i prilagodbenost.

metode modifikacije mRNA

Metilacija:

1. m6A : Povezana s stabilnošću mRNA, splicingom, prijevodnjom i obradom miRNA. Izazovi u otkrivanju uključuju izbor antitijela i lokalizaciju.
2. 5' Kap Nm : Pojačava stabilnost, splicing, poliadenilaciju i jezgrenski izvoz. Pomoga razlikovati sam-RNA od stranog RNA.
3. Pseudouridilacija : Promjenjuje kodone, pojačava stabilnost i reagira na stres. Katalizirana pseudouridilsintazama.

Uvođenje ne-prirodnih nukleotida:

1. Uvedeno tijekom transkripcije s dvostrukom kemikalnom modifikacijskom strategijom. Pojačava stabilnost, učinkovitost i izraz proteina.

Reporter Geni

1. Gen Zelenog Fluorescentnog Proteina (GFP) : Prednosti: Lako otkrivo, stabilna fluorescencija, neštetan ćelijama, prikladan za slikanje živih ćelija. Nedostaci: Ograničena jačina fluorescencije.
2. Pojačani Zeleni Fluorescentni Protein (eGFP) : Prednosti: Preko šest puta svjetliji od divljeg tipa GFP-a, što ga čini prikladnijim kao reporter gen za proučavanje izraza gene, regulacije, diferenciranja ćelija i lokalizacije te transporta proteina unutar organizama.
3. Crveni Fluorescentni Protein (npr., mCherry) : Prednosti: Duži valni duljini pobude i emisije, što rezultira nižim pozadinskim vrijednostima tijekom intracelularnog slikanja, odlična fluorescentska jačina i fotostabilnost, te niža ćelijska toksičnost. Nedostaci: Možda se ne koristi tako često kao GFP u određenim eksperimentalnim uvjetima.
4. Luciferaza mete : Prednosti: U prisutnosti ATP-a, magnezijumski jonova i kisika, može katalizirati oksidaciju luciferina u oksiluciferin, emitirajući bioluminescenciju. Odgovara za upotrebu kao kontrola za proučavanje efikasnosti prijevoda ciljanih gena u mačinskim ćelijama, živote ćelija i in vivo slikarske asimilacije.

Zaključak

Kada se odabire koji način modifikacije izvještajnog mRNA je preferiran, ovisi o specifičnim eksperimentalnim ciljevima, istraživačkim pozadini i eksperimentalnim uvjetima. Na primjer, ako je potrebna visoka osjetljivost, eGFP može biti bolji izbor. Ako je potrebno slikanje na duljim valovnim dužinama kako bi se smanjilo pozadinsko ruševljanje, crvene fluorescentske proteine poput mCherry mogu biti odgovorniji. Također, na temelju specifičnih potreba za modifikacijom mRNA (npr., povećanje stabilnosti, poboljšanje efikasnosti prijevoda), može se odabrati odgovarajući način modifikacije.

Kao prva i najveća CRDMO za mikrobiološke biologike u Velikoj Kini, Yaohai Bio-Pharma nudi kompletna prilagođena rješenja ili pojedinačne usluge, od sinteze RNA, inženjeringa i izgradnje štruka, razvoja gornjeg i donjeg toka procesa, do proizvodnje suštine lijeka na GMP ili ne-GMP razini, te usluge ispunjavanja za različite modele, poput mRNA, circRNA, plazmidnog RNA, rekombinantnih proteina, peptida, enzima, jednodomenskih antigena i VLP-a za ljudske i veterinarske namjene.

Yaohai Bio-Pharma također aktivno traži globalne partnerе, institucionalne ili pojedinačne, i nudi najkonkurentniju kompenzaciju u industriji. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]