Entdecke die faszinierende Welt der Lithiumchlorid-Präzipation

Die Lithiumchlorid-Präzipation wird weit verbreitet zur Trennung von RNA aus Lösungen verwendet.

Hier ist die Aufschlüsselung des Prozesses:

1. Probenaufbereitung: Beginnen Sie mit einer Probe, die RNA enthält, wie z. B. in-vitro transkriptmischung.

2. Lithiumchlorid-Zuführung: Fügen Sie ein geeignetes Volumen einer konzentrierten Lithiumchloridlösung zur RNA-Lösung hinzu.

3. Inkubation: Nach dem Zufügen von Lithiumchlorid wird die Lösung bei niedriger Temperatur, normalerweise etwa bei -20°C, inkubierte. Dadurch sedimentieren RNA-Moleküle aus der Lösung heraus.

4. Zentrifugation: Nach der Inkubation wird die Lösung bei hoher Geschwindigkeit zentrifugiert. Dies trennt die gesedimentierte RNA vom Rest der Lösung, die Impureitäten enthält.

5. Spülen: Sobald die Zentrifugation abgeschlossen ist, entfernen Sie das Überstrat sorgfältig, ohne die RNA-Sedimentierung zu stören. Spülen Sie die RNA-Partikel mit kaltem Ethanol oder Isopropanol, um eventuell verbliebene Impureitäten zu entfernen.

6. RNA-Wiederherstellung: Nach dem Waschen wird der RNA-Schwerpunkt kurz in der Luft getrocknet und dann in einem geeigneten Puffer, wie z.B. TE-Puffer (Tris-EDTA-Puffer) oder destilliertem Wasser wieder aufgelöst. Sanftes Pipettieren oder Wirbelströmungen könnten notwendig sein, um die RNA angemessen wieder aufzulösen.

7. Quantifizierung und Analyse: Schließlich wird das isolierte RNA mittels Ultraviolett-Spektroskopie oder Fluoreszenzmethode quantifiziert. Dies bestimmt die Konzentration und Reinheit des RNA-Proben, was für nachgelagerte Anwendungen wie LNP-Einkapselung und Zelltransfektion wichtig ist.

Yaohai Bio-Pharma beherrscht die Verwendung der Lithiumchlorid-Fällungsmethode im Produktionsprozess, da sie einfach, kostengünstig und erzeugt hochwertige RNA, die für eine Vielzahl von molekularbiologischen Anwendungen geeignet ist. Es ist jedoch wichtig, die Bedingungen (z.B. Lithiumchlorid-Konzentration, Inkubationszeit, Zentrifugierspeed) zu optimieren, um die besten Ergebnisse für ein bestimmtes Probe zu erreichen.

Wir bieten zudem maßgeschneiderte RNA-Synthesedienste an, darunter mRNA (bis zu 10 kb), circRNA (bis zu 4 kb) und LNP-Katalogprodukte, gestützt auf unsere leistungsstarke und eigene RNASci-Plattform. Wir haben eine vollständige Reihe von mRNA/circRNA-Synthesetechnologien etabliert, um hochwertige RNA bereitzustellen, wie Sequenzdesign und -optimierung, IVT, Zirkularisierung, Reinformung und LNP-Verkapselung. Alle Produkte werden unter strengen Qualitätskontrollstandards freigegeben.

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