Entdecken Sie die faszinierende Welt der Lithiumchloridfällung

Die Lithiumchloridfällung wird häufig zur Trennung von RNA aus Lösungen verwendet.

Hier ist die Aufschlüsselung des Prozesses:

1. Probenvorbereitung: Beginnen Sie mit einer RNA-haltigen Probe, wie z. B. In-vitro- Transkriptmischung.

2. Lithiumchlorid-Zugabe: Fügen Sie der RNA-Lösung ein entsprechendes Volumen konzentrierter Lithiumchlorid-Lösung hinzu.

3. Inkubation: Nach Zugabe von Lithiumchlorid wird die Lösung bei niedriger Temperatur, in der Regel etwa -20°C, inkubiert. Dadurch werden RNA-Moleküle aus der Lösung ausgefällt.

4. Zentrifugation: Nach der Inkubation wird die Lösung bei hoher Geschwindigkeit zentrifugiert. Dadurch wird die ausgefällte RNA vom Rest der Lösung, der Verunreinigungen enthält, getrennt.

5. Waschen: Sobald die Zentrifugation abgeschlossen ist, entfernen Sie vorsichtig das Überstand, ohne jedoch die RNA-Fällung zu beeinträchtigen. Waschen Sie die RNA-Partikel mit kaltem Ethanol oder Isopropylalkohol, um alle verbleibenden Verunreinigungen zu entfernen.

6. RNA-Resuspension: Nach dem Waschen wird der RNA-Niederschlag kurz luftgetrocknet und dann in einem geeigneten Puffer, wie TE-Puffer (Tris-EDTA-Puffer) oder destilliertem Wasser, resuspendiert. Um die RNA ausreichend zu resuspendieren, kann vorsichtiges Pipettieren oder Wirbelströme erforderlich sein.

7. Quantifizierung und Analyse: Abschließend wird die isolierte RNA mittels Ultraviolettspektroskopie oder Fluoreszenzmethode quantifiziert. Dadurch werden Konzentration und Reinheit der RNA-Probe bestimmt, was für nachfolgende Anwendungen wie LNP-Verkapselung und Zelltransfektion wichtig ist.

Yaohai Bio-Pharma ist im Produktionsprozess auf die Lithiumchlorid-Fällungsmethode spezialisiert, da sie einfach und kostengünstig ist und hochwertige RNA produziert, die für eine Vielzahl molekularbiologischer Anwendungen geeignet ist. Es ist jedoch wichtig, die Bedingungen (z. B. Lithiumchloridkonzentration, Inkubationszeit, Zentrifugationsgeschwindigkeit) zu optimieren, um die besten Ergebnisse für eine bestimmte Probe zu erzielen.

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