Plazmidová DNA, jako in vitro transkripční (IVT) šablona, je důležitým surovinovým materiálem pro výrobu mRNA. Vysoký výnos, vysoká čistota a vysoká účinnost plazmidové DNA jsou hlavními faktory cílem během vývoje procesu plazmidů.
Yaohai Bio-Pharma nabízí kompletní řešení pro vývoj plazmidů, včetně horního proudu (fermentace), dolního proudu (čištění) procesu vývoje, charakterizace procesu a ověření procesu. Máme rozsáhlé zkušenosti s vylepšováním výnosu plazmidů a jejich izolací z komplexních matic pomocí vývoje a optimalizace fermentačních, čištění a odstraňování nečistot procesů.
Základní bioproces pro výrobu plazmidů zahrnuje: Escherichia coli (E. coli) fermentaci, sběr buněk a alkalickou lyzu, vyjasňování, koncentrace, třífázový chromatografický proces (sběr, mezivý čistící proces a dokončování), a koncentraci.
Detaily služby | Operační jednotky | Parametry |
E. coli fermentace |
Kytlice na otřes | Skladba média, antibiotikum, objem nasázení, teplota růstu a další. |
Fermentér (7 L) |
Antibiotikum, objem nasázení, teplota růstu, pH, disovaný kyslík (DO), režim krmení (např. fed-batch), krmení médii, doba fermentace a další. |
|
Úbytění buněk | Mikrofiltrace | Standard E. coli úbytkový proces |
Lýze buněk | Rezuspence buněk, alkalická lyza, neutralizace | Poměr alkoholu, čas lyzy |
Vyjasnění | Filtration | Hrubé filtrace, 20 µm a filtr 5 µm (preferované) |
Koncentrace | Ultrafiltrace, tangenciální toková filtrace | Velikost por (nebo NMWC), Transmembránový tlak (TMP), Flux, poměr objemu filtrátu k ploše membrány |
Tříúrovňová chromatografie | Chromatografie rozdělení podle velikosti (SEC) nebo gelová filtrační chromatografie (GFC) | Délka a průměr sloupce, složení vodice, objem vstřiku, složení mobilní fáze (adsorpce a desorpce), pH, rychlost proudění, podmínky vyrovnání, vazby, mytí a eluce. |
Afinní chromatografie (AF) | ||
Aniontová exchaňová chromatografie (AEX) | ||
Koncentrace | Ultrafiltrace, tangenciální toková filtrace | Velikost por (nebo NMWC), Transmembránový tlak (TMP), Flux, poměr objemu filtrátu k ploše membrány |
Více řešení pro procesovou čistku biologických látek |