Die produkte wat verkry word deur in vitro siklisering en RNase R-verryking moet verder verwyder word van in vitro transkripsie (IVT), insluitend onverbruikte substrate in sikliseringsreaksie, reaksie neweprodukte en geknipte RNA.
Yaohai Bio-Pharma het volwasse LiCl-presipitasie, magnetiese kraalsuiwering, selfontwikkelde suiwering en ander gediversifiseerde suiweringsoplossings om verskeie onsuiwerhede effektief te verwyder en hoogs suiwer circRNA voor te berei.
Suiweringsoplossing vir klein hoeveelhede circRNA vir seltransfeksie en as deel van diere-eksperimente.
Suiweringsoplossing vir klein hoeveelhede circRNA vir seltransfeksie en as deel van diere-eksperimente.
Toepassingsscenario's met hoër gehalte;
Stabiele en skaalbare suiweringsproses om aan GMP-produksievereistes te voldoen.
proses | Opsionele diens | Diensbesonderhede | Afleweringstydperk (dag) | Aflewerbares |
circRNAsuiwering | Konvensionele suiweringsoplossing | Litiumchloried neerslag | 1 | circRNA dwelmstof |
Magnetiese krale suiwering | ||||
Hoogs suiwer circRNA suiwering | Voorbereidende hoëprestasie vloeistofchromatografie (HPLC) | 1-2 | ||
Buffer ruil | ultrafiltrasie | 1 | ||
circRNAkwaliteitsbeheer | Konsentrasie/suiwer | Ultraviolet (UV) spektrofotometrie | 0.5 | Toetsverslag |
Purity | Agarosegelelektroforese (AGE)/E-gel | |||
HPLC-opsioneel | 1 |
Toepassingscenario's kan bereik word.
circRNA met 'n suiwerheid van meer as 90%;
Deur streng beheer van RNases in die eksperimentele omgewing en verbruiksgoedere, word RNA-afbraak effektief voorkom.
Yaohai Bio-Pharma het 'n volwasse circRNA-suiweringsoplossing gevestig wat verskeie prosesverwante onsuiwerhede effektief kan verwyder.
Die sirkelvormige RNA-produkte wat deur die konvensionele oplossing gesuiwer word, word steeds duidelik gemeng met geknipte RNA en introne.
Na die suiweringsoplossing wat deur Yaohai Bio-Pharma ontwikkel is, kan verskeie lineêre RNA-onsuiwerhede, soos geknipte RNA en introne, suksesvol verwyder word.
circRNA Uitdrukking Validasie
Deur 'n konvensionele liposoom te gebruik, word gesuiwerde eGFP circRNA in 293T-selle getransfekteer, en 'n fluoressensiesein word na 24 uur waargeneem en word steeds versterk op 48 uur. Die fluoressensiesein kan steeds op die 7de dag en die 14de dag na transfeksie opgespoor word.