Plasmid DNA, as in vitro transkripsie (IVT) template, is 'n belangrike grondstof vir mRNA vervaardiging. Hoë opbrengs, hoë verfyning en hoë herwinning van plasmid DNA is die hoof doelwit tysens die plasmid prosesontwikkeling.
Yaohai Bio-Pharma verskaf 'n eenmalige oplossing vir plasmidontwikkeling, insluitend bo-op (fermentasie), onder-op (verfyning) prosesontwikkeling, proses karakterisering en prosesvalidasie. Ons het uitgebreide ervaring om plasmidopbrengs te verbeter en dit uit komplekse matrisee te isoler deur fermentasie, verfyning en impureitatsverwyderingsprosesse te ontwikkel en te optimaliseer.
Basiese bioproesses vir plasmidvervaardiging sluit in: Escherichia coli (E. coli) fermentasie, sel oes en alkaliese lysis, klarifikasie, konsetrasie, drie-stap kromatografieproses (vang, tussenvyfing, en polissage), en konsetrasie.
Diensbesonderhede | Eenhede Operasies | Parameters |
E. coli fermentasie |
Rukfles | Media samestelling, antibiotika, inokulumvolume, groeitemperatuur, ens. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotika, inokulumvolume, groeitemperatuur, pH, opgeloste suurstof (DO), voedingswyse (bv. fed-batch), voedingmedia, fermentasietyd, ens. |
|
Selt oes | Mikrofiltrering | Standaard E. coli oesproses |
Sellisering | Selheroplosing, alkaliese lisering, neutralisasie | Alkali-verhouding, liseringstyd |
Verduideliking | Filtrasie | Ruw filtrasie, 20 µm en 'n 5 µm filterreeks (voorkeurlik) |
Konsentrasie | Ultrafiltrasie, tangensiale vloeifiltratie | Porformaat (of NMWC), Transmembrandruk (TMP), Vloei, verhouding van filtraatvolume tot membranoppervlak |
Driestappe chromatografie | Grootte-uitgesluit chromatografie (SEC), of gelfiltraties chromatografie (GFC) | Kolomlengte en -deursnee, buffersamenstelling, inspuitvolume, mobiele fase-samenstelling (adsorpsie en desorpsie), pH, vloeiwyse, uitbalings-, binding-, was- en eluïsieringsvoorwaardes. |
Affiniteitskromatografie (AF) | ||
Aniounruilingkromatografie (AEX) | ||
Konsentrasie | Ultrafiltrasie, tangensiale vloeifiltratie | Porformaat (of NMWC), Transmembrandruk (TMP), Vloei, verhouding van filtraatvolume tot membranoppervlak |
Meer Biologiese Verfyningprosesoplossings |