Sel-gebaseerde Potensie-toetse
Die Betekenis van mRNA Potensie-toets
Met die vinnige ontwikkeling van mRNA-vakswels en terapeutika word 'n spesifieke reeks van analitiese metodes benodig om die potensie te toets (hul biologiese aktiwiteit te bepaal), wat die vertaalingsdoeltreffendheid van mRNA behels. Hierdie metodes is gewoonlik gebaseer op seltransfeksie en funksionele toetse van die teikenprotein.
Yaohai Bio-Pharma bied selgebaseerde potensie-toetse vir mRNA-drogsubstansies of LNP-produkte, insluitend seltransfeksie (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 selle, ens.) en ELISA-of Western Blotting (WB)-toetse.
Reguleringsvereistes vir Potensie-toetse
Volgens die WHO-reguleringsverwagtinge, “Moet die krag van elke part van die eindige vakswyn bepaal word deur 'n toereikend kwantitatiewe en gevalideerde funksionele metode(e). Moontlike in vitro-kragtoetsings mag selgebaseerde transaksiesisteme of selloosse toetse insluit.” En die USP het 'n “selgebaseerde toets” voorgestel om die krag van mRNA te toets, d.w.s., uitdrukking van die teikenprotein.
Analitiese Metode
|
Analise
|
Metodes
|
|
Kragtoetsinge
|
Selgebaseerde transaksie en teikenproteïen-identifisering:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7-selle, ens.
|
Prosedure
Stap 1. Selgebaseerde Transaksie met mRNA of mRNA-LNP
Die selle word gekultiveer en getransfekteer met mRNA of mRNA-LNP. In detail, word mRNA na gemeng wees met 'n transaksie-agtik getransfekteer, terwyl mRNA-LNP direk in die selle getransfekteer word. Na 24-48 ure, word die oorskot wat die uitgedrukte proteïen bevat deur sentrifugering verduidelik.
Stap 2. Funksionele Toetse van die Teikenproteïen
Voer ELISA-of WB-toetse uit om die funksionele binding van die teikenproteïne te evalueer.
Gevallestudie
Seltgebaseerde Kragsvertoningstoetse van mRNA-steekproewe
Yaohai-BioPharma het 'n seltgebaseerde kragsvertoningstoetsmetode vir mRNA ontwikkel, wat seltkweek, selpenetrering en proteïenfunksionele toetse insluit. Ons het eGFP mRNA, mCherry mRNA, luciferase mRNA en spike-proteïen mRNA in 293T-selle gepentreer en die teikenproteïen deur fluoresensie, liggie of gekleurde signale, WB, ELISA opgespoor.
Seltgebaseerde Kragsvertoningstoetse van mRNA-produkte deur Yaohai Bio-Pharma
AF
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
MS
BE
MK
UR
BN
