DNA plasmid, như ống nghiệm mẫu phiên mã (IVT), là một nguyên liệu thô quan trọng để sản xuất mRNA. Năng suất cao, độ tinh sạch cao và khả năng phục hồi cao của DNA plasmid là yếu tố chính Mục tiêu trong quá trình phát triển quá trình plasmid.
Yaohai Bio-Pharma cung cấp giải pháp toàn diện để phát triển plasmid, bao gồm phát triển quy trình ngược dòng (lên men), xuôi dòng (tinh chế), mô tả đặc tính quy trình và xác nhận quy trình. Chúng tôi có nhiều kinh nghiệm trong việc cải thiện hiệu suất plasmid và tách nó khỏi các nền mẫu phức tạp bằng cách phát triển và tối ưu hóa các quy trình lên men, tinh chế và loại bỏ tạp chất.
Quy trình sinh học cơ bản để sản xuất plasmid bao gồm: Escherichia coli (E. coli) lên men, thu hoạch tế bào và ly giải kiềm, làm trong, cô đặc, quy trình sắc ký ba bước (thu giữ, tinh chế trung gian và đánh bóng) và cô đặc.
Chi tiết dịch vụ | Hoạt động đơn vị | Thông số |
E. coli Lên men |
Lắc bình | Thành phần môi trường, kháng sinh, thể tích vật liệu cấy, nhiệt độ tăng trưởng, v.v. |
Lên men (7 L) |
Kháng sinh, thể tích vật liệu cấy, nhiệt độ tăng trưởng, pH, oxy hòa tan (DO), chế độ cho ăn (ví dụ: cho ăn theo mẻ), môi trường cho ăn, thời gian lên men, v.v. |
|
Thu hoạch tế bào | Microfiltration | Tiêu chuẩn E. coli quá trình thu hoạch |
ly giải tế bào | Tái huyền phù tế bào, ly giải kiềm, trung hòa | Tỷ lệ kiềm, thời gian ly giải |
Làm rõ | Lọc | Lọc thô, bộ lọc 20 µm và bộ lọc 5 µm (ưu tiên) |
Tập trung | Lọc siêu lọc, lọc dòng tiếp tuyến | Kích thước lỗ rỗng (hoặc NMWC), áp suất xuyên màng (TMP), dòng chảy, tỷ lệ thể tích lọc trên diện tích màng |
Sắc ký ba bước | Sắc ký loại trừ kích thước (SEC) hoặc sắc ký lọc gel (GFC) | Chiều dài và đường kính cột, thành phần đệm, thể tích tiêm, thành phần pha động (hấp phụ và giải hấp), pH, tốc độ dòng, điều kiện cân bằng, liên kết, rửa và rửa giải. |
Sắc ký ái lực (AF) | ||
Sắc ký trao đổi anion (AEX) | ||
Tập trung | Lọc siêu lọc, lọc dòng tiếp tuyến | Kích thước lỗ rỗng (hoặc NMWC), áp suất xuyên màng (TMP), dòng chảy, tỷ lệ thể tích lọc trên diện tích màng |
Thêm giải pháp quy trình thanh lọc sinh học |