Технологије укључене у синтезу мРНА

Модалитет

Технологије укључене у синтезу мРНА

Ин витро синтеза мРНА

Главне компоненте иРНК су 5'-цап, 5'-УТР, отворени оквир за читање (ОРФ), 5'-УТР и 5' поли А реп, који су неопходни за одржавање функције мРНК. Истраживачи су користили различите методе да идентификују и оптимизују секвенце и структуре мРНА.

Синтеза мРНК се врши на основу ин витро транскрипта (ИВТ) коришћењем линеарних ДНК шаблона, РНК полимераза (Т3, Т7 или СП6), немодификованих или модификованих нуклеотида, ензима и одговарајућих реагенаса.

5' Измена капице

Секвенце зреле мРНК из еукариоцита показују капу од 7-метилгуанозина (м7Г) на 5' крају, што побољшава стабилност мРНК и ефикасност транслације. Постоје две опште методе за хватање мРНК ин витро. Прво, мРНА може бити затворена заједно са ин витро транскриптом додавањем аналога капице структуре м7ГпппГ (нпр. ЦлеанЦап) у ИВТ систем. Ова метода ко-транскрипционог затварања обезбеђује природну структуру капсуле од 5' и повећава ефикасност затварања на скоро 90-99%. Друго, мапирање мРНА се такође може постићи мапирањем ензимских реакција након ин витро реакције транскрипције.

ПолиА модификација

Поли(А) реп такође продужава полуживот мРНК ин виво и побољшава ефикасност транслације мРНК. Дужина амплификованог поли(А) репа треба да буде 100-300 нуклеотида. Поред тога, модификовани аденозин повећава стабилност поли А репа против деградације ћелијске РНазе. Поли А реп се може уметнути ин витро транскрипцијом коришћењем ДНК шаблона који кодира поли А, што доводи до специфичне дужине секвенце поли А. Рекомбинантна поли А полимераза се такође може користити ензимском полиаденилацијом након транскрипције мРНА.

Модификација нуклеотида

Модификовани нуклеозиди могу инхибирати препознавање и/или активацију рецептора за препознавање образаца (ПРР) и побољшати ефикасност мРНК вакцина на два потпуно различита начина. Додатак одређених хемијски модификованих нуклеозида, укључујући псеудоуридин (ψ), 1-метилпсеудоуридин (м1ψ), тиоуридин (с4У) и 5-метилцитозин (м5Ц) може спречити активацију ТЛР7/8 и других урођених имуних рецептора, који значајно смањују имуногност. од мРНА.

Систем за испоруку мРНА

Да би одржала функцију мРНК, потребно је да уђе у цитоплазму домаћина и изрази специфичне антигене. Један од најтежих изазова са којима се суочавају мРНК вакцине и терапије лежи у испоруци мРНК у циљне ћелије са довољно високим нивоима транслације јер су за то потребни високо специфични и ефикасни системи за испоруку мРНК. Развијено је и коришћено неколико вектора за испоруку мРНА, укључујући дендритске ћелије (ДЦ), протамин, катјонске полимере и катјонске липозоме.

Комплекси катјонских липида са мРНА и другим препаратима могу заједно да формирају наночестице величине 80-200 нм под називом липидне наночестице (ЛНП). Као један од најнапреднијих система за испоруку мРНА, ЛНП укључује јонизујуће катјонске липиде, природне фосфолипиде, холестерол и полиетилен гликол (ПЕГ). Неколико РНК вакцина и терапија (сиРНА и мРНА) које је одобрила Америчка управа за храну и лекове засновано је на ЛНП системима за испоруку.

Иаохаи Био-Пхарма нуди решење на једном месту за РНК

Каталог РНА производа

Каталог мРНА производа
Каталог саРНА производа
Каталог производа цирцРНА

Прилагођена синтеза РНК

Прилагођена синтеза мРНА
Прилагођена саРНА синтеза
Прилагођена цирцРНА синтеза

мРНА ЦДМО услуге

Развој процеса
ГМП Мануфацтуринг
Асептично пуњење и завршетак
Анализа и тестирање

Цустом Деливераблес

Разред	Деливераблес	Спецификација	aplikacije
нон-ГМП	Супстанца лека, мРНА	0.1~10 мг (мРНА)	Претклиничка истраживања као што су трансфекција ћелија, развој аналитичких метода, студије пре стабилности, развој формулације
	Лек производ, ЛНП-мРНА
ГМП, стерилност	Супстанца лека, мРНА	10 мг~70 г	Нови истраживачки лек (ИНД), одобрење за клиничко испитивање (ЦТА), снабдевање за клиничко испитивање, апликација за биолошка лиценца (БЛА), комерцијално снабдевање
	Лек производ, ЛНП-мРНА	5000 бочица или напуњених шприцева/картриџа

Све категорије

Технологије укључене у синтезу мРНА

Модалитет