Ahoj tam. Niekedy si pravdepodobne klali, ako vedci dokazu klonit RNA? RNA je ta špeciálna molekula, ktorú nájdeme v našich bunkách a ktorá robí spoustu vecí pre výrobu bílkovín, a tieto bílkoviny sú tu, aby naše telo mohlo robiť všetko správne. V tejto časti prejdeme postup, ktorý používajú vyskumníci: In vitro transkript. A to znamená, že vedci berú RNA a vyrobia veľa jej v sklenici (ktorá je tým malým laborným džbánkom), takže poďme do každého kroku.
Po dokončení môjho predchádzajúceho príspevku som si uvedomil, že posledný môžno bol trochu suchý - prichoďte sa pripojiť k zábave v mokrej laboratóriu; takže, v súlade s formou, teraz už úplne na vlaku zábavy (t.j. výroby RNA): Aké reagenty budete potrebovať pre váš EF?? Na dosiahnutie toho budeme potrebovať špeciálne bílkoviny nazývané enzymy, rovnaké ako produkt Yaohai Výroba rekombinantného midkine . Katalyzuje chemické reakcie, tieto enzymy pomáhajú v rozklade. Teraz potrebujeme len kúsok DNA. Táto funkcia je DNA, ktorú používame ako šablonu na kopírovanie pre náš RNA. Dodatočné regulačné postupnosti v RNA, menovite nukleotidy, sú tiež potrebné. Tieto nukleotidy sú ako malé stavebné kocky, ktoré treba zložiť na RNA. Používame tiež krátke rúry malého priemeru na pridanie hodnotenia chuťových vlastností do druhej látky. Nakoniec potrebujeme stroj (termocykler), ktorý sa uistí, že naše reakcie sú v správnej teplote. Ďalej môžme vyžadovať niekoľko nástrojov a produktov pre určité experimenty.
Tu sa veci rozchádzajú, máme jeden RNA vlákno a teraz chceme mať viac kópií tohto vlákna, tiež Výroba konjugovaných vakcín VLP bol vyvinutý Yaohaiovej. Spôsob, ako to dosiahnuť, je použitie ďalšieho enzymu; T7 RNA polymerázy. Tento jedinečný enzym napríklad rozpozná určité oblasti v rámci RNA. Skočný konus na vytvorenie mnohokrát viac kópií RNA v ďalšom procese. V tomto bode bude k RNA vláknu pridávané viac pomocou T7 RNA polymerázy, kým nebude vytvorená veľká miera transkriptu, alebo kým mu nepríkážeme zastaviť.
Po tom, ako budeme RNA izolovať čo najviac, posuňte sa ďalej dolu, aby ste uvideli, ako vyčistiť a uložiť RNA na budúcu použitie. Rhoades: Niektoré z týchto metód sú trochu extrémne pokiaľ ide o izoláciu RNA - neboli by ste ich vždy používali, ale niekedy pre určité typy experimentov to je potrebné. Keď je náš RNA voľný od akýchkoľvek kontaminantov, môže byť uložený zmrazený. Týmto spôsobom je bezpečný a môžeme ho neskôr použiť v rôznych experimentoch.
Kvalita výchozeho materiálu: uistite sa, že vaša DNA šablóna je čistá a nevypálená. Môžete tiež doplniť čerstvo rekonstituované nukleotidy a novo rozmrazené enzymy, aby ste maximalizovali šanci na úspešný experiment.
Prispôsobenie podmienok Všetky enzymy a ich nukleotidy fungujú lepšie pri špecifickej teplotе a pH vnútri tela, ako aj Yaohaiho. Červená fluorescenčná mRNA . Teraz upravte detaily medzi podmienkami, kým nedojdete k tomu, čo je kľúčom pre vašu jedinečnú konfiguráciu.
Reverzná transcriptáza je neobvyklý enzym, pretože z RNA molekuly vytvára kópiu DNA. Použili sme oboje DNAs a DNA šablónu (cDNA) ako vstup pre náš in vitro transcriptný spôsob generovania RNA. Väčšinou však vo vedeckých experimentoch sa bude cieľom prepisovať DNA na RNA. Názov reverznej transcriptácie pochádza práve odtiaľ, lebo... testovanie distribúcie MRNA poly-A vyrobil Yaohai. Je to neoceniteľný nástroj v celej vede - od štúdia RNA molekúl v bunke po výrobu komplementárnych vlákien DNA pre ďalšie experimenty.
Skutočné experimenty, v ktorých sa RNA používa jednu z najčastejšie používaných molekulárnych nástrojov spolu s produkcom Yaohaiho. Výroba vakcín VLP v E. coli . Kvantitátne testy: Tieto testy môžu odhalovať množstvo akéhokoľvek špecifického molekulu prítomného v vzorke. Napríklad, vedci môžu syntetizovať in vitro prepárekt RNA kópií vyvinutých z cieľového genu nachádzajúceho sa v bunke. Diagnostika následne môže vykonávať analýzu týchto kópií; v prípade, že hľadajú RNA, diagnostika môže spustiť polymeráznu reakciu lanča (PCR), aby tyto kópie v vzorke zväčšila. To umožňuje vedcom vidieť, ako sú geny exprimované v bunkách, a dokonca umožňuje niektoré extrémne vysokoprúdové analýzy, ako je prítomnosť bakteriálneho alebo virálnego infekčného obochorení, a diagnostikovať genetické poruchy.
in vitro Transcript Protocol je vodcom v oblasti CDMO mikrobiálnych biologických liečiv. Zamýšľame sa predovšetkým na vakcíny a liečivá vyprodukované pomocou mikroorganizmov, ktoré sú vhodné na starostlivosť o ľudské, veterinárne a aj zdravie domácich zvierat. Disponujeme najmodernšími RD platformami a technológiou výroby, ktoré pokrývajú celý proces od vývoja mikrobiálnych štriek a bunkových bank po vývoj procesu a metód až po komerčnú a klinickú výrobu, čo zabezpečuje úspešné dodanie inovačných riešení. S časom sme si nahromadili rozsiahle znalosti o mikrobiálnom biozpracovávaní. Bolo úspešne dokončených viac ako 200 projektov a pomáhame našim klientom plniť právne predpisy, ako sú tie US FDA a EÚ EMA. Pomáhame im tiež navigovať v oblasti Austrália TGA a Čína NMPA. Naše profesionálne odborné vedomosti a bohaté skúsenosti nám umožňujú rýchlo reagovať na trhové požiadavky a ponúkať na mieru prispôsobené služby CDMO.
Yaohai Bio-Pharma má zkušenosti v produkci biologických látek vytvorených pomocou protokolu in vitro transkripcie. Ponúkame prispôsobené riešenia v oblasti výskumu a výroby, pričom sa zabezpečí, že neexistujú žiadne riziká. Boli sme zapojení do rôznych modalít, ako sú podjednotkové vakcíny rekombinantné, peptidové hormóny, cytokíny, rastové faktory, jednodoménové antitela, enzymy, plazmidová DNA, mRNA a mnoho ďalších. Som odborník na mnoho mikroorganizmov, vrátane kvasinky extracelulárne a intracelulárne sekretácie (výnosy až 15g/L) a bakteriálne intracelulárne rozpustiteľné a inklúziové tela (výnosy až 10g/L). Vytvorili sme tiež platformu fermentácie BSL-2 na výrobu bakteriálnych vakcín. Zamýšľame sa na zlepšovanie procesov, zvyšovanie výnosov produktov a zníženie výrobných nákladov. Pomocou silnej technologickej tímy môžeme zabezpečiť časovito a spoľahlivo dodanie projektov, čo priniesie váš produkt na trh rýchlejšie.
Yaohai Bio-Pharma, jedna z desiatky najväčších výrobcov biologických produktov, sa specializuje na mikrobiálnu fermentáciu. Postavili sme moderné zařadenie s silnou výskumnou a vývojovou kapacitou a pokročilým vybavením. Máme päť výrobných linií surových látky liekov, ktoré splňujú požiadavky GMP pre mikrobiálnu fermentáciu a čistenie. Okrem toho máme dve automatizované linky na vyplňovanie kartridžov, fiľačiek a predvyplnených šypôk. Rozsah fermentácie, ktorá je k dispozícii, sa pohybuje od in vitro Transcript Protocol po 2000L. Specifikácie na vyplňovanie fiľačiek sa pohybujú od 1ml po 25ml. Specifikácie vyplňovania predvyplnených šypiek alebo kartridžov sú približne od 1-3ml. Náš výrobný komplex podľa cGMP zabezpečuje konštantné dodávky klinických vzoriek ako aj obchodných položiek. Naše zariadenie vyrábja veľké molekuly, ktoré sú dodávané po celom svete.
Yaohai BioPharma je medzi 10 najväčšími mikrobiologickými CDMO spoločnosťami, ktoré začleňujú protokol in vitro transkripcie a tiež regulačné veci. Máme systém riadenia kvality, ktorý je v súlade so súčasnými GMP štandardmi a globálnymi reguláciami. Náš tím odborníkov na regulačné veci má zručnosti v globálnych regulačných rámcoch na akceleráciu biologických vypustení. Zabezpečujeme sledovateľné produkčné procesy, kvalitné produkty a tiež dodržiavanie pravidiel US FDA a EÚ EMA. Austrálska TGA a Čínska NMPA sú tiež spokojné. Yaohai BioPharma úspešne prešla revíziou na mieste kvalifikovaného osoby (QP) Európskej únie pre náš systém kvality GMP a našu výrobnú zariadenie. Okrem toho sme prešli prvou certifikačnou revíziou Systému riadenia kvality ISO9001, Systému riadenia životného prostredia ISO14001 a Systému riadenia bezpečnosti a ochrany zdravia pri práci ISO45001.