Dobrý deň. Zaujímalo vás niekedy, ako môžu vedci klonovať RNA? RNA je táto špeciálna molekula, ktorú nájdeme v našich bunkách a ktorá robí veľa vecí na tvorbu proteínov a proteíny sú tu, takže naše telo môže robiť všetky správne veci. V tejto časti si ukážeme oveľa zaujímavejší protokol, ktorý výskumníci používajú: In vitro transkript. A to všetko znamená, že vedci berú RNA a vyrábajú z nej veľa v skúmavke (čo je táto malá nádoba, ktorú používajú laboratóriá), takže sa pustite do každého kroku.
Keď som dokončil svoj predchádzajúci príspevok, uvedomil som si, že ten posledný mohol byť trochu suchý-poď pripojiť sa k-zábave-v-mokrom-laboratóriu; takže v súlade s formou teraz, keď ste dobre a skutočne na zábavnom vlaku (sic RNA-tvorby): Aké činidlá atď. budete potrebovať pre váš EF? Aby sme to dosiahli, budeme potrebovať špeciálne proteíny nazývané enzýmy, identické s produktom Yaohai Rekombinantná výroba midkinov. Katalyzuje chemické reakcie, tieto enzýmy pomáhajú pri rozklade. Takže teraz potrebujeme len náš kúsok DNA. Táto funkcia je DNA, ktorú používame ako šablónu na kopírovanie pre našu RNA. Potrebné sú aj ďalšie regulačné sekvencie v RNA, menovite nukleotidy. Tieto nukleotidy sú ako malé stavebné bloky, ktoré musia byť zostavené, aby vytvorili RNA. Používame tiež krátke trubičky s malým priemerom, aby sme hodnotenie chuti premenili na iné. Nakoniec potrebujeme stroj (termocykler), ktorý zabezpečí, aby naše reakcie mali správnu teplotu. Okrem toho môžeme na určité experimenty vyžadovať niekoľko nástrojov a produktov.
Takže tu sa veci líšia, máme jeden reťazec RNA a teraz by sme chceli mať viac jeho kópií, tiež Výroba konjugovaných VLP vakcín vyvinuté spoločnosťou Yaohai. Spôsob, ako dosiahnuť použitie iného enzýmu; T7 RNA polymeráza. Tento jedinečný enzým napríklad rozpoznáva špecifické oblasti v RNA. skákací kužeľ na vytváranie oveľa viac kópií RNA v procese. V tomto bode bude do vlákna RNA pridané viac pomocou T7 RNA polymerázy, kým sa nevytvorí množstvo transkriptu, alebo kým mu nepovieme, aby prestal.
Potom, čo sme čo najviac izolovali RNA, prejdite ďalej nadol, aby ste videli, ako vyčistiť a uložiť RNA pre budúce použitie. Rhoades: Niektoré z týchto metód sú z hľadiska izolácie RNA trochu extrémnejšie – nie vždy by ste to použili, ale niekedy je to potrebné pre určité typy experimentov. Akonáhle je naša RNA bez akýchkoľvek kontaminantov, môže byť skladovaná zmrazená. Takto je to bezpečné a môžeme to neskôr použiť v rôznych experimentoch.
Kvalita východiskového materiálu: uistite sa, že vaša šablóna dna je čistá a nie je celá spálená. Môžete tiež doplniť čerstvo rekonštituované nukleotidy a čerstvo rozmrazené enzýmy, aby ste maximalizovali šance na úspešný experiment.
Podmienky jemného doladenia Všetky enzýmy a ich nukleotidy fungujú lepšie pri špecifickej teplote a pH vo vašom tele, rovnako ako enzýmy Yaohai. Červená fluorescenčná mRNA. Teraz trochu upravte nuansy medzi podmienkami, kým sa nedostanete tam, kde je kľúčom k vášmu jedinečnému nastaveniu.
Reverzná transkriptáza je neobvyklý enzým, pretože vytvára kópiu DNA z molekuly RNA. Použili sme DNA aj templát DNA (cDNA) ako vstup pre našu in vitro transkriptovú metódu na generovanie RNA. Vo väčšine experimentov by však vedci chceli prepísať DNA na RNA. Reverzná transkripcia je miesto, kde dostane svoje meno rovnaké ako Testovanie distribúcie mRNA poly-A vyrobené spoločnosťou Yaohai. Je to neoceniteľný nástroj naprieč vedou – od štúdia molekúl RNA vo vnútri buniek až po produkciu komplementárnych reťazcov DNA pre ďalšie experimenty.
Experimenty v reálnom živote, v ktorých je RNA spolu s produktom Yaohai jedným z najčastejšie používaných molekulárnych nástrojov Výroba VLP vakcíny v E. coli. Kvantitatívne testy: Tieto testy môžu odhaliť množstvo akejkoľvek špecifickej molekuly prítomnej vo vzorke. Vedci môžu napríklad syntetizovať in vitro transkriptový prípravok kópií RNA odvodených z cieľového génu umiestneného v bunke. Diagnostika potom môže tieto kópie testovať v prípade, že sú. pri hľadaní RNA môže diagnostik spustiť polymerázovú reťazovú reakciu (PCR) na amplifikáciu týchto kópií vo vzorke. To umožňuje vedcom vidieť, ako sú gény exprimované na bunkách, a dokonca umožňuje niektoré extrémne vysoko výkonné testy, ako je prítomnosť bakteriálnej alebo vírusovej infekcie, a diagnostikovať genetické poruchy.
In vitro Transscript Protocol je popredné miesto v mikrobiálnych biologických CDMO. Zamerali sme sa na mikrobiálne produkované vakcíny a terapeutiká, ktoré sú vhodné pre manažment zdravia ľudí, veterinárov, ako aj domácich zvierat. Disponujeme najmodernejšími platformami RD a výrobnou technológiou, ktorá pokrýva celý postup od vývoja mikrobiálnych kmeňov a bunkového bankovníctva, cez vývoj procesov a metód až po komerčnú a klinickú výrobu, ktorá zaisťuje úspešné dodávanie inovatívnych riešení. Postupom času sme nazhromaždili rozsiahle poznatky o mikrobiálnom spracovaní biologických látok. Úspešne bolo dokončených viac ako 200 projektov a pomáhame našim klientom dodržiavať predpisy, ako sú napríklad predpisy amerického FDA a EU EMA. Pomáhame im tiež navigovať v Austrálii TGA a Číne NMPA. Naša profesionálna odbornosť a rozsiahle skúsenosti nám umožňujú rýchlo reagovať na požiadavky trhu a poskytovať služby CDMO na mieru.
Yaohai Bio-Pharma má skúsenosti s výrobou biologických látok vytvorených na základe protokolu prepisu in vitro. Ponúkame prispôsobené riešenia RD a výroby, pričom sa ubezpečujeme, že neexistujú žiadne riziká. Boli sme zapojení do rôznych modalít, ako sú rekombinantné podjednotkové vakcíny, peptidové hormóny, cytokíny, rastové faktory, jednodoménové protilátkové enzýmy, plazmidová DNA MRNA a mnoho ďalších. Špecializujeme sa na mnohé mikroorganizmy, vrátane kvasinkovej extracelulárnej a intracelulárnej sekrécie (výťažok až 15 g/l), ako aj na baktérie intracelulárne rozpustné a inklúzne telieska (výťažok až 10 g/l). Vytvorili sme tiež fermentačnú platformu BSL-2 na vytvorenie bakteriálnych vakcín. Zameriavame sa na zlepšovanie procesov, zvyšovanie výťažnosti produktov a znižovanie výrobných nákladov. Využitím silného technologického tímu môžeme zabezpečiť rýchle a spoľahlivé dodanie projektu, ktoré prinesie váš produkt na trh rýchlejšie.
Yaohai Bio-Pharma, top 10 výrobcov biologických produktov, sa špecializuje na mikrobiálnu fermentáciu. Vybudovali sme moderné zariadenie s robustnými schopnosťami RD a pokročilým vybavením. Máme päť výrobných liniek liečivých látok, ktoré spĺňajú požiadavky GMP na mikrobiálnu fermentáciu a čistenie. Máme tiež dve automatizované linky na plnenie a dokončovanie zásobníkov, liekoviek a naplnených injekčných striekačiek. Fermentačné škály dostupné na použitie sa pohybujú od protokolu in vitro transkriptu po 2000 1. Špecifikácie pre plnenie liekovky sa pohybujú od 25 ml do 1 ml. špecifikácie plnenia naplnenej injekčnej striekačky alebo zásobníka sa pohybujú približne od 3 do XNUMX ml. Naše výrobné zariadenie v súlade s cGMP zabezpečuje stálu dodávku klinickej vzorky, ako aj komerčných položiek. Naša továreň produkuje veľké molekuly, ktoré sa posielajú do celého sveta.
Yaohai BioPharma je 10 najlepších mikrobiálnych CDMO, ktoré zahŕňa protokol prepisu in vitro, ako aj regulačné záležitosti. Máme systém riadenia kvality, ktorý je v súlade so súčasnými normami GMP, ako aj globálnymi predpismi. Náš tím regulačných expertov ovláda globálne regulačné rámce na urýchlenie biologických štartov. Zabezpečujeme vysledovateľnosť výrobných procesov kvalitných produktov, ako aj dodržiavanie pravidiel US FDA a EU EMA. Spokojné sú aj Austrália TGA a Čína NMPA. Spoločnosť Yaohai BioPharma úspešne prešla auditom kvalifikovanej osoby (QP) Európskej únie pre náš systém kvality GMP, ako aj naše výrobné zariadenie. Okrem toho sme absolvovali prvé certifikačné audity systému manažérstva kvality ISO9001, systému environmentálneho manažérstva ISO14001 a systému manažérstva bezpečnosti a ochrany zdravia pri práci ISO45001.