CirRNA luciferázy svetlušiek exprimuje fluorescenčný proteín, pôvodne izolovaný zo svetlušky, Photinus pyralis. Tento proteín emituje bioluminiscenciu v prítomnosti substrátu, luciferínu. CirRNA luciferázy svätojánskej mušky sa bežne používa ako pozitívna kontrola pri transfekcii circRNA a vývoji systému dodávania. Luciferáza svetlušiek môže byť tiež použitá v cicavčej bunkovej kultúre na meranie génovej expresie aj životaschopnosti buniek.
Yaohai Bio-Pharma ponúka čistá luciferázová circRNA svetlušiek produkt s optimalizovanými kodónmi a interným ribozómovým vstupným miestom (IRES), na zlepšenie účinnosti cirkulácie cirRNA luciferázy svätojánskej mušky, stability a účinnosti translácie.
Produkt
CirRNA luciferázy svetlušiek, Metóda permutovaného intrón-exónu (PIE).
Detaily produktu
Produkt |
Svetlušská luciferázová circRNA |
Kat. Nie | ciP003 |
Metóda syntézy |
Samospájanie intrónu skupiny I |
Obsah RNA | 100 ug~10 mg (OD260) |
Čistota | A260 / A280 |
Identifikácia a čistota | Elektroforéza na agarózovom géli (AGE) |
Bufferu | Voda bez RNázy (kvapalina) |
Doprava | Loď so suchým ľadom; alebo pri teplote okolia |
Uskladnenie |
● Kvapalina, pri alebo pod -20 °C ● Lyofilizovaný prášok pri 4 °C |
Využitie |
Reportérový gén, Pozitívna kontrola |
Príprava circRNA a expresia buniek
Prijatie linearizovanej plazmidovej DNA (pDNA), ktorá obsahuje cirRNA luciferázy svetlušky kódujúce gény ako in vitro templátu transkriptu (IVT), získali sme čistú luciferázovú circRNA svetlušiek in vitro transkripcia, cirkulácia a čistenie.
Čistá circRNA luciferázy svetlušiek zmiešaná s komerčným transfekčným činidlom bola transfekovaná do 293T buniek v 96-jamkovej platni. A luciferázový test sa uskutočnil po 48 hodinách.
Expresia luciferázovej circRNA svetlušiek v 293T bunkách