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Desenvolvimento de Plasmídeo

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ARN de IVT

Desenvolvimento de Plasmídeo

DNA plasmidial, como in vitro modelo de transcrição (IVT), é uma matéria-prima importante para a fabricação de mRNA. Alto rendimento, alta purificação e alta recuperação de DNA plasmídico são os principais objetivo durante o desenvolvimento do processo plasmídico.

A Yaohai Bio-Pharma fornece uma solução completa para o desenvolvimento de plasmídeos, incluindo desenvolvimento de processos upstream (fermentação), downstream (purificação) e caracterização e validação de processos. Temos ampla experiência em melhorar o rendimento de plasmídeos e isolá-lo de matrizes complexas, desenvolvendo e otimizando processos de fermentação, purificação e remoção de impurezas. 

Detalhes de serviços

O bioprocesso básico para fabricação de plasmídeos inclui: Escherichia coli (E. coli) fermentação, colheita de células e lise alcalina, clarificação, concentração, processo de cromatografia em três etapas (captura, purificação intermediária e polimento) e concentração.

Detalhes de serviços Operações Unitárias parâmetros
E. coli fermentação
 Balão de agitação Composições de meios, antibiótico, volume de inóculo, temperatura de crescimento e etc.

Fermentador (7 L)

Antibiótico, volume de inóculo, temperatura de crescimento, pH, oxigênio dissolvido (OD), modo de alimentação (por exemplo, lote alimentado), meio de alimentação, tempo de fermentação e etc.
Colheita de células Microfiltração Padrão E. coli processo de colheita
Lise celular Ressuspensão celular, lise alcalina, neutralização Proporção alcalina, tempo de lise
Esclarecimento Filtração Filtragem bruta, 20 µm e um trem de filtros de 5 µm (preferencial)
Concentração Ultrafiltração, filtração de fluxo tangencial Tamanho dos poros (ou NMWC), pressão transmembrana (TMP), fluxo, proporção entre volume de filtrado e área de membrana  
Cromatografia em três etapas Cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) ou cromatografia de filtração em gel (GFC)  Comprimento e diâmetro da coluna, composição do tampão, volume de injeção, composição da fase móvel (adsorção e dessorção), pH, vazão, equilíbrio, ligação, lavagem e condições de eluição.
Cromatografia de afinidade (AF)
Cromatografia de troca aniônica (AEX)
Concentração Ultrafiltração, filtração de fluxo tangencial Tamanho dos poros (ou NMWC), pressão transmembrana (TMP), fluxo, proporção entre volume de filtrado e área de membrana 
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