Kepentingan Saringan Ketegangan
Menyaring hos yang sesuai adalah perlu untuk pembangunan CMC biologi, yang menentukan kualiti dan konsistensi produk dan proses pembuatan. Objektif langsung saringan hos adalah untuk menyediakan bank sel primer calon (PCB), dengan tahap ekspresi yang tinggi dan kestabilan yang tinggi dari segi kestabilan laluan dan kestabilan penyimpanan. Penapisan hos yang sesuai adalah perlu untuk dua sebab utama:
- Pertama, untuk memilih hos mikrob dengan tahap ekspresi yang tinggi. Terdapat berbilang strain yang tersedia secara komersial, yang digunakan untuk menyatakan jenis protein yang berbeza, seperti protein toksik, protein larut atau protein eukariotik.
- Kedua, untuk menyaring hos dengan kestabilan genetik. Ujian kestabilan genetik adalah perkara utama sepanjang kitaran hayat pengeluaran. Adalah dicadangkan bahawa kestabilan genetik yang tinggi diiktiraf sebagai satu lagi ciri utama untuk terikan yang sesuai.
Kata kunci: pemilihan terikan mikrob, saringan terikan mikrob, saringan bakteria atau yis berkemampuan tinggi, saringan terikan yang menghasilkan tinggi, saringan terikan yang sangat stabil, saringan terikan yang stabil genetik Aplikasi: perubatan manusia, perubatan haiwan, vaksin, biologi sintetik, molekul besar rekombinan biologi, reagen biologi
Perkhidmatan Saringan Terikan Yaohai Bio-Pharma
Mendapat manfaat daripada lebih 10 tahun pengalaman CDMO dalam biologi mikrob, kami menyokong pembangunan dan pembuatan pelbagai molekul besar, termasuk vaksin subunit rekombinan, zarah seperti virus (VLP), hormon (insulin, GLP-1, hormon pertumbuhan), sitokin ( Interleukin-2/IL-2, IL-15, IL-21), faktor pertumbuhan (EGF, FGF, NGF), nanobodies/Antibodi domain tunggal (sdAbs), enzim, dsb.
Kami telah mengumpul pengalaman yang kaya dalam pemilihan pelbagai jenis vektor plasmid, dan perumah mikrob, termasuk Bakteria Escherichia coli (E. coli), dan yis Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Kami boleh mencari sistem ekspresi terbaik untuk biologi unik anda.
Kami mengumpul pelbagai perumah mikrob dengan sumber yang jelas dan CoA standard, termasuk E.coli ekspresi dan ekspresi yis.
Butiran Perkhidmatan
|
Perkhidmatan
|
Butiran Perkhidmatan
|
Garis Masa/Hari Minimum
|
Deliverables
|
|
Pembinaan Terikan (E. coli)
|
Transformasi plasmid (berbilang perumah)
|
5
|
COA hos komersial Laporan pembinaan terikan
|
|
Pengesahan PCR
|
|
Pemurnian terikan
|
|
Pemeliharaan terikan
|
|
Pembinaan Terikan (Yis)
|
Penyediaan sel yis yang kompeten
|
10
|
|
Linearisasi plasmid
|
|
Transformasi elektro
|
|
Saringan rintangan/kekurangan nutrisi
|
|
Pemurnian terikan
|
|
Pemeliharaan terikan
|
|
Saringan Hos yang Sesuai
|
Pengekstrakan DNA plasmid atau Genom
|
15-20
|
Proses saringan hosCOA strain kejuruteraan
|
|
Pengesahan PCR, penghadaman enzim sekatan
|
|
Penjujukan gen sasaran
|
|
Penapisan hos ekspresi tinggi
|
|
Pemeriksaan perumah dengan kestabilan genetik
|
|
Pemeliharaan terikan
|
Kajian kes
Perumah yang sesuai meningkatkan tahap ekspresi protein sebanyak 2.5 kali ganda.
Kami ditugaskan untuk membangunkan pengeluaran tinggi E. coli ketegangan. Dan kami mencuba tiga jenis komersial E. coli hos, berdasarkan ciri-ciri protein sasaran. Ia menunjukkan bahawa strain S1-1 dan S1-2 (Rajah A: Lorong 1,2) meningkatkan tahap protein kepada 3.5 kali ganda daripada ketegangan awal pelanggan (Rajah A: Lorong 3).
Selain itu, strain S1-1 melakukan kestabilan genetik yang tinggi (Rajah B), dan ia diiktiraf sebagai strain calon untuk perbankan sel primer (PCB).
Ciri Perkhidmatan Kami
Menunjukkan kepakaran dengan pelbagai perumah mikrob, cth, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink strain1/2/3/4; S.cerevisiae and H. polymorpha.
Kami berpengalaman dengan E. coli rembesan periplasmik, ekspresi badan larut dan inklusi, serta ekspresi intrasel atau rembesan yis. Kami tidak menambah antibiotik atau menambah antibiotik di bawah bimbingan kawal selia.
Kami mewujudkan platform penapisan daya pemprosesan tinggi untuk menapis strain yang menghasilkan tinggi dan stabil daripada lebih seratus strain calon.
Ia dipastikan bahawa proses kejuruteraan terikan dan penyaringan boleh dikesan, di bawah Pengurusan Data dan Rekod yang Baik.
MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
TIDAK
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
BE
MK
UR
BN
