Pemetaan N-glycan adalah perkara penting dalam pengeluaran bi farmaseutikal. Yaohai Bio-Pharma menawarkan perkhidmatan pemetaan N-glycan menggunakan Kromatografi Cecair (Liquid Chromatography-Mass Spectrometry) (LC-MS) bagi glikan yang dikeluarkan dan dilabelkan. Langkah-langkah am untuk menyediakan sampel N-glycan termasuk pencernaan protein glikosida (GP), pengeluaran gula, pemurnian, penandaan/penjanaan semula, dan Penstrakan Fasa Pepejal (SPE).
Kami telah terlibat dalam Penakrifan Struktur Protein bagi pelbagai molekul besar, termasuk Vaksin Subunit Rekombinan, Nanobodies/VHHs/ Antibodi Single-domain (sdAbs), Fragmen Antibodi, Hormon/Peptide, Sitokina, Faktor Pertumbuhan (GF), Enzim, Kolagen, dll.
Kebuthan Pengawalan untuk Pemetaan N-Glycan
Mengikut panduan ICH Q6B, “bagi glikoprotein, kandungan karbohidrat (gula neutral, gula amino, dan asid sialik) ditentukan. Selain itu, struktur rantai karbohidrat, pola oligosakarida (profil antena), dan lokasi glikosilasi rantai polipeptida dianalisis sejauh yang mungkin.
Kaedah Analisis
| Analisis |
Kaedah |
| Pemetaan N-glycan |
Analisis Likat Kromatografi-Mass Spektrometri (LC-MS) bagi glikan yang dilepaskan dan dilabelkan |
Prosedur
1. Pelepasan glikan enzimatik dengan Peptide N-Glikosidase F (PNGase F)
2. Penyerap glikan yang dilepaskan oleh 2-aminobenzamid (2-AB)
3. Pemurnian N-glikan yang dikumpulkan pada kolom TSK Amide - 80 jika jumlah besar pemacu, garam tak mudah menguap, atau bahan dengan kumpulan amino bebas hadir
4. Penandaan oleh 2-aminobenzamid (2-AB) yang berfluor
5. Analisis LC-MS bagi N-glikan yang dilabelkan
6. Analisis data
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
