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LC-MS를 이용한 단백질 질량 분석

LC-MS를 이용한 단백질 질량 분석

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미생물 CDMO

단백질 분자량 분석

LC-MS를 통한 분자량 측정

온전한 분자량은 항상 생물학적 제제의 중요한 특성으로 인식되어 왔습니다. 원형 분자량 분석은 단백질/펩타이드 제품을 입증하고 생물학적 제제를 검증하는 데 사용됩니다. 분자량 측정은 규제 지침의 요구 사항입니다.

Yaohai Bio-Pharma는 기본, 환원, N-탈당화된 조건에서 손상되지 않은 분자량 분석을 제공합니다. 우리는 액체 크로마토그래피-질량 분석법(LC-MS)을 사용하여 손상되지 않은 분자량을 측정합니다.

분자량에 대한 규제 요건

ICH Q6에서는 "분자량(또는 크기)은 크기 배제 크로마토그래피, SDS-폴리아크릴아미드 겔 전기영동(환원 및 비환원 조건 하에서), 질량 분석법(MS) 및 기타 적절한 기법을 사용하여 측정한다"고 권장합니다.

분석 방법
Analysis 행동 양식
분자 무게 천연, 환원, N-탈당화된 단백질 또는 하위 단위의 LC-MS/액체 크로마토그래피/전기분무 질량 분석법(LC/ES-MS)
분석 절차

본래 분자량:

  • 수신된 기본 샘플에 대해 LC-MS를 수행합니다.
  • LC-MS 데이터 분석.

감소된 분자량:

  • 단백질 샘플을 적합한 환원제로 처리하는 단계;
  • 환원된 단백질에 대해 LC-MS를 수행하는 단계;
  • LC-MS 데이터 분석.

N-탈당화된 분자량:

  • 적합한 효소로 N-글리칸을 제거하는 단계;
  • N-탈당화된 단백질에 대해 LC-MS를 수행하는 단계;
  • LC-MS 데이터 분석.

감소된 N-탈당화된 분자량:

  • 단백질 샘플을 적합한 환원제로 처리하는 단계;
  • 적합한 효소로 N-글리칸을 제거하는 단계;
  • 환원된 및 N-탈당화된 단백질에 대해 LC -MS를 수행하는 단계;
  • LC-MS 데이터 분석.

단백질 소단위 분자량:

  • 소단위 절단
  • 단백질 하위 단위에 대한 LC-MS 수행
  • LC-MS 데이터 분석
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