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펩티드 매핑

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미생물 CDMO

펩티드 매핑

액체 크로마토그래피-질량 분석법(LC-MS) 기반의 펩타이드 매핑 데이터는 아미노산 서열 범위, 번역 후 변형(PTM, 예: 글리코실화)을 포함하여 천연 및 재조합 단백질의 1차 및 고차 구조에 대한 많은 양의 정보를 제공합니다. , 산화, 탈아미드화), 이황화 결합 등

Yaohai Bio-Pharma는 단백질 구조에 대한 연구 속도를 높이기 위해 LC-MS를 통해 표적 단백질에 대한 펩타이드 매핑 분석 서비스를 제공합니다.

우리는 재조합 하위 단위 백신, 나노바디/VHH/단일 도메인 항체(sdAbs), 항체 단편, 호르몬/펩타이드, 사이토카인, 성장 인자(GF), 효소, 콜라겐, 등.

펩타이드 매핑에 대한 규제 요건

ICHQ6B 가이드라인에서는 “제품을 개별 펩타이드로 선택적으로 단편화하는 것은 적절한 효소나 화학물질을 사용하여 수행되며 생성된 펩타이드 단편은 HPLC 또는 기타 적절한 분석 절차로 분석됩니다. 펩타이드 단편은 아미노산 조성 분석, N-말단 서열 분석 또는 질량 분석법(MS)과 같은 기술을 사용하여 가능한 한 식별해야 합니다. 적절하게 검증된 방법을 사용하여 활성 성분 또는 의약품(DP)의 펩타이드 매핑은 배치 출시를 위해 원하는 제품 구조를 확인하는 데 자주 사용되는 방법입니다."

분석 방법
Analysis 행동 양식
펩티드 매핑 프로테아제 소화 및 액체 크로마토그래피-질량 분석법(LC-MS) 
분석 절차

1. 환원 및 알킬화

목적은 이황화 가교를 줄이고 생성된 유리 티올을 차단하는 것입니다. 이황화물 다리의 감소는 단백질 분해를 더욱 효율적으로 만드는 단백질 구조를 여는 데 도움이 됩니다. 이 단계는 또한 사슬을 연결하는 이황화 다리를 갖는 다중 사슬 단백질(예: 단일클론 항체, mAb)의 경우 사슬 사이의 다리를 끊습니다.

2. 효소를 이용한 단백질의 소화

목적은 단백질을 펩타이드로 분해하는 것입니다. 우리는 단백질의 이론적 서열과 효소에 의한 단백질의 이론적 소화에 대한 지식을 바탕으로 효소를 선택했습니다. 이러한 방식으로 효소를 선택하면 최상의 펩타이드 매핑 분석이 가능해집니다.

3. 소화된 펩타이드 분석 자외선(UV) 및 전자분무-질량분석 검출(LC/ES-MS)을 갖춘 온라인 역상 고성능 액체 크로마토그래피를 사용합니다.

LC(역상-LC)를 이용한 극성에 따른 펩타이드 분리

펩타이드가 LC 컬럼에서 용출됨에 따라 질량 분석기는 단편 이온 정보와 함께 질량 정보를 생성하며 이를 통해 서열 정보를 결정할 수 있습니다. 우리는 서열 정보를 사용하여 펩타이드 동일성을 확인하고 기본 정보를 제공합니다.

또한 LC 컬럼에서 질량 분석기 소스로 들어가는 펩타이드로부터 단편화 정보를 생성할 수도 있습니다. 연구 요구 사항에 따라 이는 선택적 LC-MS/MS이거나 비선택적이며 직렬 MS의 형태로 간주될 수 있습니다.

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