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LC-MS를 이용한 단백질 분자량 분석

LC-MS를 이용한 단백질 분자량 분석

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미생물 CDMO

단백질 분자량 분석

LC-MS를 통한 분자량 결정

완전한 분자량은 항상 생물학적 제제의 중요한 특성으로 인식되어 왔습니다. 완전한 분자량 분석은 단백질/펩타이드 제품을 시연하고 생물학적 제제를 검증하는 데 사용됩니다. 분자량 측정은 규제 가이드라인의 요구사항입니다.

야오하이 바이오파마는 원래 상태, 환원 상태, N-탈당화 조건에서 완전한 분자량 분석을 제공합니다. 우리는 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LC-MS)을 사용하여 완전한 분자량을 결정합니다.

분자량에 대한 규제 요구사항

ICH Q6에서는 '분자량(또는 크기)는 크기 배제 크로마토그래피, SDS-폴리아크릴아미드 겔 전기영동(환원 및 비환원 조건 하), 질량 분광법(MS) 및 기타 적절한 기술을 사용하여 결정된다'고 권장하고 있습니다.

분석 방법
분석 방법
분자량 원래, 환원된, N-탈당화된 단백질 또는 서브유닛의 액체 크로마토그래피/전기분무 질량 분광법 (LC/ES-MS)
분석 절차

완정 분자량:

  • 수신된 원시 샘플에 대해 LC-MS를 수행합니다.
  • LC-MS 데이터 분석.

환원된 분자량:

  • 적절한 환원제로 단백질 샘플을 처리합니다;
  • 환원된 단백질에 대해 LC-MS를 수행합니다;
  • LC-MS 데이터 분석.

N-탈당화된 분자량:

  • 적절한 효소로 N-글리칸을 제거합니다;
  • N-데글리코실화된 단백질에 대한 LC-MS 수행;
  • LC-MS 데이터 분석.

환원되고 N-데글리코실화된 분자량:

  • 적절한 환원제로 단백질 샘플을 처리합니다;
  • 적절한 효소로 N-글리칸을 제거합니다;
  • 환원되고 N-데글리코실화된 단백질에 대한 LC-MS 수행;
  • LC-MS 데이터 분석.

단백질 서브유닛 분자량:

  • 서브유닛 절단
  • 단백질 서브유닛에 대한 LC-MS 수행
  • LC-MS 데이터 분석
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