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N-글리칸 프로파일링

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N-글리칸 프로파일링

N-글리칸 프로파일링은 생물의약품 생산에 있어 필수적입니다. 야오하이 바이오파마는 방출된 글리칸을 사용하여 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LC-MS)으로 N-글리칸 프로파일링 서비스를 제공합니다. N-글리칸 샘플 준비의 일반적인 단계에는 당단백질(GP) 소화, 탈당화, 정제, 표지/유도체화 및 고체상 추출(SPE)이 포함됩니다.

우리는 재조합 서브유닛 백신, 나노바디/VHHs/단일영역 항체(sdAbs), 항체 조각, 호르몬/펩타이드, 사이토카인, 성장 인자(GF), 효소, 콜라겐 등을 포함한 다양한 대분자의 단백질 구조 특성 분석에 참여해 왔습니다.

N-글리칸 프로파일링에 대한 규제 요구사항

ICH Q6B 가이드라인에 따르면, “글리코단백질의 경우 당 함량(중성 당, 아미노 당 및 시알산)이 결정됩니다. 또한 가능하면 당 사슬 구조, 올리고당 패턴(안테나 프로필), 다펩타이드 사슬의 글리코실화 위치가 분석됩니다.”

분석 방법
분석 방법
N-글리칸 프로파일링 방출된 글리칸의 액체 크로마토그래피-질량 분광법(LC-MS) 분석
절차들

1. 펩타이드 N-글리코시다제 F(PNGase F)를 사용한 효소적 글리칸 방출

2. 2-아미노벤즈아미드(2-AB)로 방출된 글리칸의 유도체화

3. 비휘발성 염, 세제 또는 자유 아민 기를 가진 물질이 많이 포함되어 있는 경우 TSK Amide - 80 컬럼에서 수확된 N-글리칸 정제

4. 형광성 2-아미노벤즈아미드(2-AB)로 라벨링

5. 라벨링된 N-글리칸의 LC-MS 분석

6. 데이터 분석

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