Plasmiid: Suure potentsiaaliga väike ümmargune DNA molekul

Plasmiidid, väikesed ümmargused DNA molekulid, toimivad molekulaarbioloogia uuringutes ja geeniteraapias DNA rekombinatsiooni oluliste vektoritena. Plasmiidide saagis ja kvaliteet on üliolulised, kusjuures superspireeritud osa ja endotoksiinide sisaldus on kaks olulist tegurit, mis mõjutavad plasmiidi kvaliteeti.

Plasmiidi alatüübid

Escherichia coli'st (E. coli) ekstraheeritud plasmiidid eksisteerivad erinevates alatüüpides: superspireeritud (SC), avatud ringikujulised (OC) ja lineaarsed (L) vormid (joonis 1). Nende hulgas on superspireeritud plasmiididel suurepärane stabiilsus, antigeensus ning kõrge transfektsiooni ja ekspressiooni efektiivsus.

Joonis 1. Tavaliste plasmiidi alatüüpide skemaatiline diagramm

Plasmiidse DNA agaroosgeelelektroforeesil on migratsioonikiiruse järjekord superspireeritud DNA, lineaarne DNA ja avatud tsirkulaarne DNA (joonis 2).

Joonis 2. Erinevate plasmiidi alatüüpide agaroosigeeli elektroforeesi migratsioonimuster

Yaohai Bio-Pharma on pidevalt täiustanud oma protsesse ja tehnikaid tagamaks, et transfektsiooniklassi plasmiidide superkeerdunud osakaal on ≥85% ja uurimiskvaliteediga plasmiidide osakaal ≥50%. Järgnev on juhtumi demonstratsioon (joonis 3), kus agaroosgeeli elektroforees kombineeritakse Gel-Pro Analyzeri tarkvaraga, et tuvastada ülikeritud osa.

Joonis 3. Plasmiidi superspireeritud proportsiooni kvaliteedikontrolli tulemused

Endotoksiin

Endotoksiin, gramnegatiivsete bakterite rakuseina komponent, koosneb peamiselt lipopolüsahhariidist A (LPS-A), mis on selle toksiline komponent. Plasmiidi ekstraheerimise ajal vabaneb endotoksiin lüüsilahusesse, mõjutades tõsiselt plasmiidi rakkudesse transfektsiooni efektiivsust. Lisaks võib see aktiveerida rakkudes mittespetsiifilisi immuunvastuseid, mis põhjustab katsetes valepositiivseid tulemusi.

Yaohai Bio-Pharma kasutab "mitte-sissejuhatus" ja "kõrge eemaldamise" lähenemisviisi, kontrollides rangelt endotoksiini sisaldavate reaktiivide ja materjalide kasutamist kogu puhastusprotsessi vältel. Ettevõte on välja töötanud ka tõhusa endotoksiinide eemaldamise meetodi, mis pakub kolme endotoksiinisisalduse taset: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg ja ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharmal on suure läbilaskevõimega plasmiidide ekstraheerimise teenindusliin, mis suudab tarnida 1 mg ekstraheeritud plasmiide ​​nii kiiresti kui ühe nädalaga. Vaikimisi pakub see rohkem kui seitse kvaliteedikontrolli (QC) testi, et tagada kvaliteetsete ja kõrgetasemeliste plasmiidide tarnimine mitmest vaatenurgast.

Otsime aktiivselt ka institutsionaalseid või individuaalseid globaalseid partnereid. Pakume valdkonna kõige konkurentsivõimelisemat tasu. Kui teil on küsimusi, võtke meiega julgelt ühendust: [email protected]