Plasmid: väike ringjooneline DNA-molekul suure potentsiga

Plasmidid, väiksed ringdõnaga DNA-molekulid, teenivad oluliste vektorigaena molekulaarbioloogia uurimistes ja geeniteraapias. Plasmidite tootlus ja kvaliteet on otsustavad, mille supercoilitud osakaal ja endotooside sisaldus mõjutavad oluliselt plasmidite kvaliteeti.

Plasmidi alamtüübid

Escherichia coli (E. coli)st ekstraktitud plasmidid esinevad erinevates alamtyybigas: supercoilitud (SC), avatud ringne (OC) ja lineaarne (L) kuju (Joonestis 1). Neist näitab supercoilitud plasmidid suurt stabiilsust, antigeenilisust ning kõrget transfektsiooni ja ekspresioonieffektiivsust.

Joonis 1. Lava skeemiline diagramm levinuimate plasmidi alamtüüpide kohta

Plasmid-DNA agaroosgelelektrofooreesib on liikumiskiiruse järjekord järgmine: supercoilitud DNA, lineaarne DNA ja avatud ringne DNA (Joonis 2).

Joonis 2. Erinevate plasmidi alamtüüpide agaroosgeelektrofoorsete liikumismustrid

Yaohai Bio-Pharma on pidevalt parandanud oma protsesse ja tehnikaid, et tagada, et transfeerimisreast plasmidite superkoolne osa oleks ≥85% ja uurimisreast plasmidite superkoolne osa ≥50%. Allpool on näidisjuhtumi demonstreerimine (joon 3), kus agarose geel elektrooforeesi kasutatakse koos tarkvara Gel-Pro Analyzer, et tuvastada superkoolne osakaal.

Joon 3. Plasmidi superkoolse osakaalu kvaliteedikontrolli tulemused

Endotoxin

Endotoksiin on Gram-negatiivsete baktseriate rakkuseini komponent, mille toksiline osa koosneb peamiselt liidosahis A-st (LPS-A). Plasmidi ekstraktiooni ajal vabaneb endotoksiin liitumissolu ning see võib oluliselt mõjutada plasmidi transfeerimise efektiivsust rakkesse. Lisaks võib see aktiveerida mittespesiifilisi immuunivastuseid rakkes, mis võib põhjustada eksperimentides valepositiive.

Yaohai Bio-Pharma kasutab "mitte-sisestamise" ja "kõrge eemalduse" meetodit, hoides rangesti kontrolli all endotoksiini sisaldavate reagentide ja materjalide kasutamist tühjendamisprotsessi. Ettevõte on arendanud ka efektiivse endotoksiini eemaldusmeetodi, pakkudes kolme taseme endotoksiini sisu: ≤0,1 EU/µg, ≤0,01 EU/µg ja ≤0,005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharmal on kõrge läbimispeegli plasmidi ekstraktseerimise teenust, mis võimaldab 1 mg ekstrakteeritud plasmidite toimetada juba ühe nädala jooksul. Vaikimisi pakub see enam kui seitse kvaliteedikontrolli (QC) testi, et tagada kvaliteetsete ja kõrgete standarditega plasmidite toimetamine mitmetes perspektiividest.

Oleme samuti aktiivselt otsimas institutsioonilisi või isiklike globaalseid partnereid. Pakume tööstuses kõige konkurentsivõimsamat kompensatsiooni. Kui teil on mingeid küsimusi, palun ei esitage kontaktimist: [email protected]