Kvaliteedi kontroll ja rakendused rekombinantsete proteiinide puhul

Kvaliteetikontroll rekombinantsete proteiinide puhul on oluline eksperimentaalsete andmete usaldusväärsuse ja korduvuse seisukohalt. Igal sammul, alates projektikonstruktsioonist kuni tootmisprotsessini, on vaja struktureeritud kvaliteetikontrollstrateegiaid.

Kvaliteetikontrollstrateegiad

Tööstussektor järgib rangelt standardoperaatsiooniprotsedüüreid, samal ajal peab akadeemiline kogukond tugevdama professionaalknowledgeet, et parandada andmete korduvust. Proteiinid spetsiifiliste bioloogiliste rakenduste või biokeemiaomadustega nõuavad määratud kvaliteetikontrolli (QC) strateegiaid.

Rasked näited ja lahendused

Yaohai Bio-Pharma võtab omale laialdse kogemuse rekombinantsete proteiinide tootmise ja puhastamise valdkonnas ning töötab ekspertide meeskonnaga, tagades teie proteiinide tootmise suure puhastusega. Meie sadu projektilisi kogemusi kasutades soovitab Yaohai, kuidas optimeerida proteiinide puhastamist.

Nukleehaprodude sidumisega seotud proteiinid: Nukleinsäärühma eemaldamiseks on vajalikud sammud, nagu nukleaseid või PEI-sedimentatsioon. A260nm/A280nm suhe jälgitakse nukleinsäärühma kontsentratsiooni tuvastamiseks.

Hiir ferritiin põhikett 1 krüpto-EM jaoks: Puhastamisprotsesside tuleb optimeerida ning nukleaseid lisada, et vähendada A260nm/A280nm suhet ja tagada proteiini puhasus.

Hübridiaine inimdsRBEC: Rakkude lüüsimine toimub ürea sisaldava buffeeriga, järgnevalt veerus refoldimine funktsionaalselt aktiivsete proteiinide saamiseks.

Divaalentsete katjoonidega siduvad proteiinid: Spetsiaalsed divaalentsed katjoonid peavad olema esindatud ekspresseerimise ja puhastamise ajal ning liigendajaid tuleb vältida.

Raud-sülvesisaldavad proteiinid: Imidatsi tuleb vältida, et [2Fe ± 2S] klaster ei hävinud ning tagada õige proteiini foldimine ja funktsioneerimine.

LLT1-dissotsieeruv fragment: Mutandi disain optimeerib dissülfiidside vormimist ja proteiini kipplemise, mis tagab stabiilsete ja kõrge tootmishulga proteiinide saamise.

CLK1 Kinaasi Krystalliseerimine: Koos väljendamine λ-fosfaatasega eemaldab fosfaatid fosfateerimispuudest, ning suurusseeriumikromaatika (SEC) ja anioonvahetuskromaatika kasutatakse homogeense CLK1 saamiseks ilma heterogeenseta fosfateerimiseta.

Antigeenina Kasutatavad Proteiinid: Puhastuse hindamine on vajalik tugevalt immunogeensete proteiinide kontsenteerimise vältimiseks. Struktuursete epitoodide antikehade puhul peab antigeeni kolmemõõtmelise konformatsiooni säilitama.

Agregeerumisele Kuuluvad Proteiinid: Strateegiad nagu erinevate päritoludesse ekspresseerimine ja kasvatustemperatuuri madalamatamine kasutatakse agregeerumisprobleemide piiramiseks, ning kiired puhastusstrateegiad on planeeritud.

Endotoksiide Eemaldamine: Meetodid nagu positiivselt laaditud kromaatika ja polükaatliigendi affiiniteedikromaatika eemaldavad endotoksiidid, tagades, et LPS tasemed oleksid allolemised rakenduspiirides.

Proteiini Kompleksid: Alamühikud väljendatakse eraldi ja monteeritakse in vitro või kokkuväljendatakse funktsionaalsete komplekside moodustamiseks. Kompleksi terviklikkus hindatakse homogeensuse ja molaaressa määras.

Kohustuslik väljaandmine

Proteiini tootmine algab strateegilise disaini abil, arvestades biokemilisi omadusi ja rakendusi. Väljendamise, puhastamise ja kvaliteedikontrolli ajal optimeeritakse tingimused ja meetodid stabiilsuse, mittekondenseerumise ja loomuliku oleku tagamiseks. Puhastatud proteiinid teenivad mitmesuguseid järeltöötamise eesmärke, nagu biofüüsika iseloomustamine.

Yaohai Bio-Pharma otsib ka aktiivselt globaalseid partnerite institutsioonide või isikute naftas ning pakub tööstuses kõige konkurentsivõimsemaid tasusid. Kui teil on midagi küsimusi, siis ÄRGE HESITATE meiega ühendust võtta: [email protected]