La base de la encapsulación es el diseño y desarrollo del sistema de entrega. Un sistema de administración bien diseñado permite que las moléculas de ARN circular ingresen al cuerpo sin ser degradadas por las enzimas de ARN y luego se entreguen de manera efectiva al sitio objetivo, crucen la membrana celular y se liberen intracelularmente.
Las nanopartículas lipídicas (LNP) son el mejor sistema de administración disponible, con ventajas en encapsulación, expresión in vivo y seguridad in vivo en comparación con otros sistemas de administración. Los LNP con fragmentos de ácido nucleico se tragan fácilmente en las células y forman cuerpos intracelulares. Una vez que ingresa a la célula, el ambiente ácido del cuerpo intracelular protona y carga positivamente la cabeza del lípido ionizado, fusionándose así con la membrana interna del cuerpo intracelular y liberando el ácido nucleico objetivo en la célula para su acción.
El servicio de circRNA de Yaohai Bio-Pharma continúa mejorando y puede proporcionar un servicio de encapsulación de circRNA-LNP para optimizar los parámetros críticos relevantes del proceso y mejorar la consistencia y reproducibilidad de la producción de fármacos de circRNA.
Procesos | Detalle de Servicios | Periodo de Entrega (Día) | Lo que recibe el cliente |
encapsulación de circRNA-LNP | Pretratamiento de materiales y líquidos. | 2 | Producto farmacéutico (DP) circRNA-LNP |
Mezcla de dispositivos de microfluidos | |||
Filtración de flujo tangencial | 1 | ||
Filtración esterilizante | |||
control de calidad circRNA-LNP | Eficiencia de encapsulación | 1 | Informe de prueba |
Tamaño de partícula e índice de polidispersidad. | |||
potencial zeta |
Síntesis rápida, alta eficiencia en I+D y soluciones preoptimizadas;
La proporción de encapsulación puede alcanzar más del 90%;
El tamaño de las nanopartículas lipídicas se puede controlar cambiando la tasa y proporción de inyección de fluido;
Los productos circRNA-LNP están validados mediante expresión celular in vitro y pueden expresar la proteína objetivo de manera eficiente.
Se preparan muestras de circRNA de LNP-eGFP y las diferentes dosis de las mismas (1 ug, 2 ug y 4 ug) se transfectan directamente en células 293T para verificar si pueden expresar la proteína objetivo. Después de 48 h de transfección, se puede observar una señal fluorescente clara y hay un efecto de aumento de dosis de intensidad de fluorescencia.
Se toma como control Lipo-circ_eGFP, compuesto por liposoma y circRNA de eGFP no encapsulado.