Los productos obtenidos mediante ciclación in vitro y enriquecimiento con RNasa R requieren una mayor eliminación de la transcripción in vitro (IVT), incluidos los sustratos no consumidos en la reacción de ciclación, los subproductos de la reacción y el ARN mellado.
Yaohai Bio-Pharma tiene precipitación de LiCl madura, purificación de perlas magnéticas, purificación de desarrollo propio y otras soluciones de purificación diversificadas para eliminar eficazmente diversas impurezas y preparar ARNcirc de alta pureza.
Solución de purificación para pequeñas cantidades de circRNA para transfección celular y como parte de experimentos con animales.
Solución de purificación de pequeñas cantidades de circRNA para transfección celular y como parte de experimentos con animales.
Escenarios de aplicación con mayor calidad;
Proceso de purificación estable y escalable para cumplir con los requisitos de producción GMP.
Procesos | Servicio opcional | Detalle de Servicios | Periodo de Entrega (Día) | Lo que recibe el cliente |
purificación de circRNA | Solución de purificación convencional | Precipitación de cloruro de litio | 1 | sustancia farmacológica circRNA |
Purificación de perlas magnéticas | ||||
Purificación de circRNA de alta pureza | Cromatografía líquida preparativa de alta resolución (HPLC) | 1 - 2 | ||
Intercambio de tampón | La ultrafiltración | 1 | ||
control de calidad del circARN | Concentración/purificar | Espectrofotometría ultravioleta (UV) | 0.5 | Informe de prueba |
Pureza | Electroforesis en gel de agarosa (AGE)/E-gel | |||
HPLC opcional | 1 |
Se pueden lograr escenarios de aplicación.
circRNA con una pureza superior al 90%;
Mediante un control estricto de las RNasas en el entorno experimental y los consumibles, se previene eficazmente la degradación del ARN.
Yaohai Bio-Pharma ha establecido una solución de purificación de circRNA maduro que puede eliminar eficazmente diversas impurezas relacionadas con el proceso.
Los productos de ARN circular purificados con la solución convencional todavía están obviamente mezclados con ARN mellado e intrones.
Después de la solución de purificación desarrollada por Yaohai Bio-Pharma, se pueden eliminar con éxito varias impurezas de ARN lineal, como ARN mellado e intrones.
Validación de la expresión de circRNA
Utilizando un liposoma convencional, el ARNcirc de eGFP purificado se transfecta en células 293T y se observa una señal de fluorescencia después de 24 h que continúa mejorando a las 48 h. La señal de fluorescencia todavía se puede detectar el día 7 y el día 14 después de la transfección.