En el proceso de preparación de ARNm por transcripción in vitro (IVT), se requiere ADN plasmídico linealizado como plantilla de transcripción IVT con la ayuda de la polimerasa de RNA T7. Un ADN plasmídico de alta calidad es crucial para la transcripción in vitro.
Basado en la madura plataforma de servicio de preparación de plásmidos, Yaohai Bio-Pharma puede ofrecer un servicio de preparación de ADN plasmídico linealizado de alta pureza y alto estándar para lograr una transcripción IVT eficiente.
Detalles de los Servicios
| Proceso |
Servicio opcional |
Detalles del Servicio |
Período de Entrega (día laborable) |
| Preparación de Plásmido Circular |
Síntesis de genes |
Síntesis de Genes (Terceros) |
7 a 10 |
| Amplificación de Plásmidos |
Amplificación de Plásmidos |
2 |
| Extracción de Plásmidos |
| Preparación de Plásmidos Linealizados |
Linealización y purificación de plásmidos |
Linealización de plásmidos |
1 |
| Purificación de ADN Linealizado |
| Control de calidad de ADN de plásmido |
Concentración pureza |
Espectrofotometría Ultravioleta (UV) |
1-2 |
| Conformación de plásmido |
Electroforesis en Gel de Agarosa (AGE) |
| Electroforesis Capilar (CE)-Opcional |
| Identificación de plásmidos |
Identificación de enzimas de restricción/AGE |
Nuestras características
- Plantilla de Plásmido Freecut
Selección flexible de métodos de linealización
- Alta Tasa de Recuperación
Optimización de los métodos de extracción y purificación de ADN para lograr altas tasas de recuperación.
- Control de calidad estricto
Estrictos estándares de control de proceso, con una tasa de conformación superhelical de muestras de plásmidos para investigación superior al 80%.
- Plataforma de Proceso Madura
Servicios de preparación y control de calidad de plásmidos de alto estándar y alta eficiencia para satisfacer las necesidades experimentales.
Estudio de Caso
Tomando como ejemplo el producto mRNA_luciferase del catálogo de Yaohai Bio-Pharma, la muestra de plásmido de plantilla de transcripción (grado de investigación) tiene una proporción superhelical superior al 90%, una proporción de linealización cercana al 100% y una relación de transcripción posterior de hasta 1:200 (plásmido DNA linealizado:mRNA).
El mRNA_luciferase obtenido mediante la preparación de un plásmido linealizado como plantilla se transfiere a células 293T, y la actividad de la reacción enzima-sustrato se evalúa 24 horas después de la transfección.
Se puede detectar una señal clara de actividad fuerte de luciferasa, es decir, la proteína de luciferasa se expresa eficientemente, lo que sugiere que la pureza de la plantilla de transcripción puede satisfacer completamente el requisito de preparación de mRNA de alta calidad.
Ensayo de Proporción de Plásmido Superenrollado
Validación de la Expresión de mRNA de Luciferasa in Vitro
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