Základem zapouzdření je návrh a vývoj dodávacího systému. Dobře navržený transportní systém umožňuje molekulám circRNA vstoupit do těla, aniž by byly degradovány RNA enzymy, a pak být účinně dopraveny do cílového místa, procházet buněčnou membránou a být uvolněny intracelulárně.
Lipidové nanočástice (LNP) jsou nejlepším dostupným transportním systémem s výhodami v enkapsulaci, in vivo expresi a in vivo bezpečnosti ve srovnání s jinými transportními systémy. LNP s fragmenty nukleové kyseliny jsou snadno spolknuty do buněk a tvoří intracelulární tělíska. Jakmile vstoupí do buňky, kyselé prostředí intracelulárního těla protonuje a pozitivně nabije hlavu ionizovaného lipidu, čímž se spojí s vnitřní membránou intracelulárního těla a uvolní cílovou nukleovou kyselinu do buňky k působení.
Služba Yaohai Bio-Pharma circRNA se neustále zlepšuje a může poskytovat službu zapouzdření circRNA-LNP pro optimalizaci relevantních kritických parametrů procesu a zlepšení konzistence a reprodukovatelnosti výroby léčiv circRNA.
Proces | Podrobnosti služby | Dodací lhůta (den) | Dodávky |
zapouzdření circRNA-LNP | Předúprava materiálu a kapalin | 2 | circRNA-LNP léčivý produkt (DP) |
Mikrofluidní míchání zařízení | |||
Filtrace s tangenciálním tokem | 1 | ||
Sterilizační filtrace | |||
kontrola kvality circRNA-LNP | Účinnost zapouzdření | 1 | Zkušební protokol |
Velikost částic a index polydisperzity | |||
Zeta potenciál |
Rychlá syntéza, vysoká účinnost výzkumu a vývoje a předem optimalizovaná řešení;
Poměr zapouzdření může dosáhnout více než 90 %;
Velikost lipidových nanočástic lze řídit změnou rychlosti a poměru vstřikování tekutiny;
Produkty circRNA-LNP jsou validovány in vitro buněčnou expresí a mohou účinně exprimovat cílový protein.
Připraví se vzorky LNP-eGFP circRNA a jejich různé dávky (1 ug, 2 ug a 4 ug) se přímo transfekují do buněk 293T, aby se ověřilo, zda mohou exprimovat cílový protein. Po 48 hodinách transfekce lze pozorovat jasný fluorescenční signál a existuje efekt eskalace dávky intenzity fluorescence.
Lipo-circ_eGFP, tvořený liposomem a nezapouzdřenou eGFP circRNA se bere jako kontrola.