Produkty získané in vitro cyklizací a obohacením RNázy R vyžadují další odstranění z in vitro transkripce (IVT), včetně nespotřebovaných substrátů v cyklizační reakci, vedlejších produktů reakce a nickované RNA.
Yaohai Bio-Pharma má vyzrálou precipitaci LiCl, purifikaci magnetickými kuličkami, samostatně vyvinutou purifikaci a další diverzifikovaná purifikační řešení pro účinné odstranění různých nečistot a přípravu vysoce čisté circRNA.
Purifikační roztok pro malá množství circRNA pro transfekci buněk a jako součást pokusů na zvířatech.
Purifikační roztok pro malá množství circRNA pro transfekci buněk a jako součást pokusů na zvířatech.
Aplikační scénáře s vyšší kvalitou;
Stabilní a škálovatelný proces čištění pro splnění požadavků na výrobu GMP.
Proces | Volitelná služba | Podrobnosti služby | Dodací lhůta (den) | Dodávky |
circRNA purifikace | Konvenční čisticí roztok | Srážení chloridu lithného | 1 | léčivá látka circRNA |
Čištění magnetickými kuličkami | ||||
Vysoce čistá purifikace circRNA | Preparativní vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) | 1-2 | ||
Výměna vyrovnávací paměti | Ultrafiltrace | 1 | ||
kontrola kvality circRNA | Koncentrace / čištění | Ultrafialová (UV) spektrofotometrie | 0.5 | Protokol o zkoušce |
Čistota | Elektroforéza na agarózovém gelu (AGE)/E-gel | |||
HPLC - volitelně | 1 |
Aplikačních scénářů lze dosáhnout.
circRNA s čistotou vyšší než 90 %;
Prostřednictvím přísné kontroly RNáz v experimentálním prostředí a spotřebního materiálu je účinně zabráněno degradaci RNA.
Společnost Yaohai Bio-Pharma vytvořila zralý čisticí roztok circRNA, který dokáže účinně odstranit různé nečistoty související s procesem.
Kruhové RNA produkty purifikované konvenčním roztokem jsou stále zjevně smíchány s RNA a introny.
Po purifikačním roztoku vyvinutém společností Yaohai Bio-Pharma mohou být úspěšně odstraněny různé nečistoty lineární RNA, jako je RNA a introny.
Validace exprese circRNA
Použitím konvenčního liposomu je purifikovaná eGFP circRNA transfekována do 293T buněk a fluorescenční signál je pozorován po 24 hodinách a nadále se zvyšuje po 48 hodinách. Fluorescenční signál lze stále detekovat 7. a 14. den po transfekci.