Příprava circRNA vyžaduje lineární RNA jako předchůdce (RNA předchůdce) pro cyklování, kde je RNA předchůdce obvykle připravena pomocí linearizovaného plazmidového DNA jako transkripční šablony a in vitro transkribovaná za pomoci T7 RNA polymerázy.
Vysokokvalitní plazmidové DNA je nezbytná pro in vitro transkripci (IVT). Na základě dospělé platformy pro přípravu plazmidů může Yaohai Bio-Pharma nabídnout službu přípravy lineárního plazmidového DNA (pDNA) s vysokou čistotou a standardem, aby se zajistila integrita produktů IVT.
Detaily služeb
| Proces |
Volitelná služba |
Detaily služby |
Doba dodání (pracovní den) |
| Příprava kruhového plazmidu |
Syntéza genu |
Syntéza genu (Třetí strana) |
7-10 |
| Amplifikace plazmidu |
Amplifikace plazmidu |
2 |
| Extrakce plazmidu |
| Příprava linearizovaného plazmidu |
Linearizace a čištění plazmidu |
Linearizace plazmidu |
1 |
| Očištění linearizované DNA |
| Kontrola kvality plazmidové DNA |
Koncentrace a čistota |
Ultravioleťová (UV) spektrofotometrie |
1-2 |
| Konformace plazmidu |
Elektroforeze v agárovém geлу (AGE) |
| Kapilární elektroforeze (CE) - Volitelné |
| Identifikace plazmidu |
Identifikace restrikčních enzymů / AGE |
Naše funkce
- Šablonový plazmid s volbou
Pružné vybrání metod linearizace
Optimalizace metod extrakce a očišťování DNA pro dosažení vysoké úspěšnosti izolace.
Přísné standardy řízení procesu, s mírou superhelikální konformace plazmidních vzorků pro výzkum přes 80 %.
- Zrálá platformová procedura
Vysoké standardy a efektivní služby přípravy plazmidů a kontroly kvality pro splnění experimentálních potřeb.
Případová studie
Na příkladu produktu Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA je poměr supercoilu tranzkripčních šablonových plazmidních vzorků (výzkumná úroveň) více než 70 %, s linearizací téměř 100 %.
mCherry circRNA je připravena pomocí linearizovaného plazmidu jako šablony a transfekována do buněk 293T. Po 24 hodinách transfekce je detekován vysoký stupeň expresivity fluorescencí (červená fluorescence), který se po 48 hodinách zvýší a stále je detekován na 7. den i 14. den po transfekci.
mCherry protein je stabilně a efektivně expresován a čistota tranzkripční šablony může splnit požadavky na kvalitní produkty farmaceutického preparátu (DP) circRNA.
In vitro ověření expresivity mCherry circRNA
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
