Podle centrálního dogmatu je poselská RNA (mRNA) mostem pro přenos genetického materiálu z DNA do proteinů.
mRNA vykonává biologickou funkci kódováním proteinů in vivo a dospělá mRNA u eukaryotických organismů se skládá ze pěti komponent: 5' Kapuce (kapková struktura), 5' UTR (nekódující oblast), ORF (otevřená čtecí rámeček), 3' UTR a 3' polyA ocas (polyadenylátový ocas).
Detaily služeb
| Proces |
Volitelná služba |
Detaily služby |
Doba dodání (den) |
| návrh a optimalizace sekvenčního řetězu mRNA |
Návrh a optimalizace kodujících sekvencí |
Vyrovnání sekvence CDS
Optimalizace kodonů v CDS
|
1 |
| Návrh a optimalizace nekódovacích sekvencí |
návrh a optimalizace sekvence 5' UTR
návrh a optimalizace sekvence 3' UTR
návrh a optimalizace sekvence polyA
|
1-2 |
Možnosti pro přizpůsobení
| 5' UTR/3' UTR |
- Přirozená sekvence UTR
- Mutantní/Strojená sekvence UTR
|
| 3' PolyA ocas |
- 100A ~120A Ocas (doporučeno)
- Segmentovaný polyA ocas
- Jiný vlastní ocas
|
Běžné strategie pro návrh posloupnosti mRNA
| součásti mRNA |
Biologické funkce |
Strategie optimalizace |
| 5’ Kap |
Chrání mRNA před degradací exonukleázami a působí společně s polyA ocasy na 3' konci, proteinem vázajícím polyA a iniciálním faktorem překladu k iniciování překladu bílkoviny. |
Přirozená struktura Cap1 vyhýbá detekčním receptorům a tak snižuje přirozenou imunitní odpověď, což lze dosáhnout jednoetapovým kovalentním uzavřením nebo dvouetapovým enzymatickým uzavřením [viz enzymatické uzavření mRNA a kovalentní uzavření pro podrobnosti]. |
| 5' UTR |
5' UTR může být uznán ribozomy, regulovat překlad mRNA a ovlivňovat stabilitu mRNA. |
Obsahují Kozakovu sekvenci bez velmi stabilního sekundárního vzoru. Přirozené UTR vysoké expresních genů jsou dále preferovány pro in vitro transkripci (IVT) mRNA, jako jsou α-globin a β-globin. |
| CDS |
Oblasti kodující pro bílkoviny a kodující sekvence pro antigény, antitěla nebo jiné funkční bílkoviny. |
Optimalizace kodonů zvyšuje úroveň překladu, s tím, že některé neoptimální kodony mohou hrát roli ve skládání bílkoviny. |
| 3' UTR |
Regulují překlad mRNA a její stabilitu. |
Přirozené UTR vysoké expresních genů jsou dále preferovány pro IVT mRNA, jako jsou α-globin a β-globin. |
| 3’ polyA ocas |
Regulují výraz bílkovin a chrání kapovou strukturu před degradací. |
Je vyžadována dostatečná délka (100-150 bp); zakódování polyA ocasu na plazmidu transkripční šablony zajišťuje přesnější délku polyA ocasu. |
Naše funkce
- Různorodý výběr UTR zdrojů
Několik zdrojů přirozených a modifikovaných knihoven UTR s vysokým výkonem; dospělá strategie modifikace UTR;
- Inovativní tým pro optimalizaci CDS
Spolupracujeme s profesionálním týmem algoritmů umělé inteligence k dokončení optimalizace kodonů.
- Rovnoměrné rozložení polyA ocasu
Přidávají se polyA sekvence podle DNA šablon, aby byla délka mRNA řízena přesněji.
- Různorodé kombinace optimalizace
Dosáhněte efektivní expresce mRNA s nízkou imunogenností.
Případová studie
Návrh sekvence duálního reportérského mRNA: mCherry-eGFP mRNA
Služba mRNA od Yaohai Bio-Pharma se neustále vylepšuje díky návrhu a optimalizaci tandemové sekvence dvou reportérských genů, která umožňuje koprocesi dvou genů.
Pomocí konvenčního transférového reagenu je tandemová sekvence dvou genů mCherry-eGFP mRNA transfikována do buněk 293T a po 48 hodinách jsou detekovány dva fluorescenční signály mCherry (červená) a zvýšené zelené fluorescenční bílkoviny (eGFP) s simultánní expresí, přičemž vrstvený graf je zdůrazněn žlutě.
Expresce mCherry-eGFP mRNA v buňkách 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
